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熒光素標(biāo)記促甲狀腺素受體抗體IgG,Anti-TSHR /FITC
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熒光素標(biāo)記促甲狀腺素受體抗體IgG,Anti-TSHR /FITC
Anti-TSHR /FITC 熒光素標(biāo)記促甲狀腺素受體抗體IgG Anti-TSHR(NT)/FITC 熒光素標(biāo)記促甲狀腺素受體抗體(N端)IgG Anti-TSLC1/FITC 熒光素標(biāo)記肺癌腫瘤阻抑基因1抗體IgG Anti-TSLP/FITC 熒光素標(biāo)記淋巴細(xì)胞生成素-1抗體IgG Anti-TTF-1/FITC 熒光素標(biāo)記甲狀腺核轉(zhuǎn)錄因子-1/甲狀腺特異增強(qiáng)子結(jié)合蛋白抗體IgG Anti-TTF-2/FITC 熒光素標(biāo)記甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-2抗體IgG Anti-Tubb3/FITC 熒光素標(biāo)記β微管蛋白-Ⅲ抗體IgG Anti-Tubulin-α/FITC 熒光素標(biāo)記微管蛋白α抗體IgG Anti-Tubulin-β/FITC 熒光素標(biāo)記微管蛋白抗體IgG Anti-Tubulin-β/FITC 熒光素標(biāo)記微管蛋白抗體IgG Anti-β-Actin/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記β-肌動(dòng)蛋白(抗體) Anti-Tubulin-γ/FITC 熒光素標(biāo)記微管蛋白-γ抗體IgG Anti-VTG/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記兔抗魚(yú)、青鳉魚(yú)卵黃蛋白原抗體IgG Anti-Tumstatin/Col4a3/FITC 熒光素標(biāo)記腫瘤抑素抗體IgG Anti-TWIST protein/FITC 熒光素標(biāo)記TWIST轉(zhuǎn)錄因子蛋白抗體IgG Rabbit Anti-human Fibrinogen/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記兔抗人可溶性纖維蛋白原抗體IgG Anti-TY3H/FITC (Tyrosine Hydroxylase ) 熒光素標(biāo)記*羥化酶抗體IgG Anti-Tyrosinase/FITC 熒光素標(biāo)記*酶抗體IgG Anti-Tβ10/FITC 熒光素標(biāo)記*β10抗體IgG Anti-UAT/FITC 熒光素標(biāo)記尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)子抗體IgG 顯微操作法:在顯微鏡下取單細(xì)胞,然后進(jìn)行單細(xì)胞培養(yǎng)。這種方法操作復(fù)雜,效率低,故不常用。
(2)有限稀釋法:將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的雜交瘤細(xì)胞用培養(yǎng)液作一定的稀釋后,按每孔1個(gè)細(xì)胞接種在培養(yǎng)皿中,細(xì)胞增值后成為單克隆細(xì)胞系。*次克隆化時(shí)加一定量的飼養(yǎng)細(xì)胞。由于*次克隆化生長(zhǎng)的細(xì)胞不能保證單克隆化,所以為獲得穩(wěn)定的單克隆細(xì)胞株需經(jīng)2~3次的再克隆才成。應(yīng)該注意的是,每次克隆化過(guò)程中所有有意義的細(xì)胞都應(yīng)冷凍保存,以便重復(fù)檢查,避免丟失有意義的細(xì)胞。
(3)軟瓊脂法:將雜交瘤細(xì)胞稀釋到一定密度,然后與瓊脂混懸。在瓊脂中的細(xì)胞不能自由移動(dòng),彼此互不相混,從而達(dá)到單細(xì)胞培養(yǎng)的目的。但此法不如有限稀釋法好。
(4)熒光激光細(xì)胞分類法:用抗原包被的熒光乳膠微球標(biāo)記雜交瘤細(xì)胞,然后根據(jù)抗原與雜交瘤細(xì)胞結(jié)合的特異性選出細(xì)胞,并進(jìn)行單細(xì)胞培養(yǎng)。
(5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇
(6)大規(guī)模單克隆抗體的制備 選出的陽(yáng)性細(xì)胞株應(yīng)及早進(jìn)行抗體制備,因?yàn)槿诤霞?xì)胞隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng),發(fā)生污染、染包體丟失和細(xì)胞死亡的機(jī)率增加。抗體制備有兩種方法。一是增量培養(yǎng)法,即將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng),在培養(yǎng)液中分離單克隆抗體。該法需用特殊的儀器設(shè)備,一般應(yīng)用無(wú)血清培養(yǎng)基,以利于單克隆抗體的濃縮和純化。zui普遍采用的是小鼠腹腔接種法。選用BALB/c小鼠或其親代小鼠,先用降植烷或液體石蠟行小鼠腹腔注射,一周后將雜交瘤細(xì)胞接種到小鼠腹腔中去。通常在接種一周后即有明顯的腹水產(chǎn)生,每只小鼠可收集5~10ml的腹水,有時(shí)甚至超過(guò)40ml。該法制備的腹水抗體含量高,每毫升可達(dá)數(shù)毫克甚至數(shù)十毫克水平。此外,腹水中的雜蛋白也較少,便于抗體的純化。
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