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上海士鋒生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第14年

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標(biāo)準(zhǔn)品
培養(yǎng)基
培養(yǎng)基原料 霍亂弧菌診斷血清 大腸艾希氏菌診斷血清 志賀氏菌屬診斷血清 沙門氏菌屬診斷血清 標(biāo)準(zhǔn)血清,診斷血清 抗生素藥敏紙片 微生物配套試劑 微生物生化管 管裝培養(yǎng)基 即用型液體培養(yǎng)基 一次性培養(yǎng)基平板 顯色培養(yǎng)基 臨床培養(yǎng)基 菌種保存培養(yǎng)基 四環(huán)素檢定、厭氧亞硫酸鹽還原桿菌檢測(cè)培養(yǎng)基 維生素檢測(cè)培養(yǎng)基 一次性衛(wèi)生用品衛(wèi)生檢測(cè)培養(yǎng)基 罐頭食品商業(yè)無(wú)菌檢測(cè)培養(yǎng)基 飲用水及水源檢測(cè)培養(yǎng)基 藥品、生物制品檢測(cè)培養(yǎng)基 化妝品檢測(cè)培養(yǎng)基 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基 啤酒檢驗(yàn)培養(yǎng)基 軍團(tuán)菌檢測(cè)培養(yǎng)基 支原體檢測(cè)培養(yǎng)基 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 彎曲桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、厭氧菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 阪崎腸桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 溶血性鏈球菌檢測(cè)培養(yǎng)基 李斯特氏菌檢測(cè)培養(yǎng)基 弧菌檢測(cè)培養(yǎng)基 乳酸菌、雙歧桿菌檢測(cè)培養(yǎng)基 酵母、霉菌檢測(cè)培養(yǎng)基 檢測(cè)培養(yǎng)基 沙門氏菌、志賀氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌及腸桿菌科檢測(cè)培養(yǎng)基 細(xì)菌總數(shù)檢測(cè),增菌培養(yǎng)基
抗體
生物試劑
細(xì)胞
菌株
血清
細(xì)胞分離試劑
試劑盒

士鋒生物DNA的瓊脂糖凝膠電泳

時(shí)間:2014/4/15閱讀:915
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一、原理
DNA在堿性的溶液中帶有負(fù)電荷,因此,在電場(chǎng)作用下朝正極移動(dòng)。在瓊脂糖凝膠中電泳時(shí),由于瓊脂糖凝膠具有一定孔徑,長(zhǎng)度不同的DNA分子由于所受凝膠的阻遏作用大小不一,遷移的速度不同,從而可以按照分子量大小得到有效分離。溴化乙錠可插入到DNA分子的雙鏈中。在紫外光的照射下,插入溴化乙錠的DNA呈橙紅色熒光,所以溴化乙錠可以作熒光指示劑指示DNA含量和位置。 

二、材料、儀器設(shè)備及試劑 
(一)材料:分子量不同的dna片段。
(二)儀器設(shè)備:1. 電泳儀;2. 紫外檢測(cè)儀;3. 水平電泳槽;4. 移液器;5. 一次性手套。
(三)試劑: 1. pH8.3 Tris-硼酸-EDTA緩沖液:稱取10.78gTris,5.500g硼酸,0.930gEDTA-Na2溶于無(wú)離子水,定容到100ml,用時(shí)稀釋10倍;2. EB溶液:溴化乙錠(10mg/ml)(用時(shí)稀釋10倍);3. 加樣緩沖液:50%甘油+0.25%溴酚藍(lán);4. 瓊脂糖。 

三、實(shí)驗(yàn)步驟 
(一)瓊脂糖凝膠的制備:1. 稱取瓊脂糖1g,加入10倍電泳緩沖液10ml,再加入蒸餾水90ml,在電爐上加熱溶解,配制成1%瓊脂糖凝膠;稍涼后加入配好的EB溶液數(shù)滴。2. 將電泳模板兩端密封,倒入瓊脂糖凝膠溶液,插入梳子。3. 冷凝后將梳子撥出,電泳膠放入電泳槽中。 
(二)加樣:取樣品溶液20μl,加入1/5體積加樣緩沖液,混勻后,將溶液加到樣品孔中,同時(shí)在另一樣品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)分子量DNA。一般DNA樣品控制在0.5~1.0μg之間。 
(三)電泳:加入pH8.3Tris-硼酸-EDTA緩沖液,通電維持2~4V/cm,電泳至溴酚藍(lán)走到膠底部邊緣時(shí)停止電泳。 
(四)染色及觀察:電泳完畢,取出凝膠模具,將其推到一塊干凈的玻璃板上,于254nm或300nm波長(zhǎng)紫外燈下觀察,DNA存在的位置呈現(xiàn)橙黃色熒光,放置時(shí)間超過4~6h后熒光減弱,因此應(yīng)立即用用國(guó)產(chǎn)全色膠卷拍照,并應(yīng)加上紅色濾色鏡。

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