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保藏亦稱(chēng)礦物油保藏法,定期移植保藏法的輔助方法。是指將菌種接種在適宜的斜面培養(yǎng)基上，條件下培養(yǎng)至菌種長(zhǎng)出健壯菌落后注入滅菌的液體石蠟，使其覆蓋整個(gè)斜面，再直立放置于低溫（4～6℃）干燥處進(jìn)行保存的一種菌種保藏方法。

低溫存法：

①簡(jiǎn)單保存法，將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1～2個(gè)月，若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3～4個(gè)月；②液氮超低溫保存法，將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中，密封于安瓿管內(nèi)，然后控制冷卻速度，使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí)，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物，都可用此法長(zhǎng)期保存。

菌種的使用范圍:

（1）合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的各種成分*是已知的各種化學(xué)物質(zhì)。這種培養(yǎng)基的化學(xué)成分清楚，釀酒酵母菌組成成分精確，重復(fù)性強(qiáng)，而且微生物在這類(lèi)培養(yǎng)基中生長(zhǎng)較慢。如高氏一號(hào)合成培養(yǎng)基、察氏（Czapek）培養(yǎng)基等。

（2）天然培養(yǎng)基。由天然物質(zhì)制成，如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯，前者用于培養(yǎng)霉菌，后者用于培養(yǎng)細(xì)菌。這類(lèi)培養(yǎng)基的化學(xué)成分很不恒定，也難以確定，但配制方便，營(yíng)養(yǎng)豐富，培養(yǎng)效果好，所以常被采用。

（3）半合成培養(yǎng)基。在天然有機(jī)物的基礎(chǔ)上適當(dāng)加入已知成分的無(wú)機(jī)鹽類(lèi)，或在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加某些天然成分，如培養(yǎng)霉菌用的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。這類(lèi)培養(yǎng)基能更有效地滿(mǎn)足微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需要。

鐿粉 99.9%1H-吡唑-3- 98%Anti-ATEXPA10  植物延長(zhǎng)蛋白（擬南芥）

茜素紅 AR，≥80.0%(HPLC)2,2,2-三 98%Anti-Ezrin/Radixin  埃茲蛋白抗體

茜素黃GG IND二叔戊酰 98%Anti-Phospho-Ezrin (Tyr353)  化埃茲蛋白抗體

茜素黃R AR雙(2,2,6,6,-四甲基-3,5-庚二酮酸)銅 99%Anti-Phospho-Ezrin (Thr567)  化埃茲蛋白抗體

堿藍(lán)6B IND(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮酸)釔 99%Anti-F1 operon positive regulatory protein(NT)  肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體（N端）

天青I Biological stain烯酸 AR,>99%(GC)，包含180-200 ppm MEHQ 穩(wěn)定劑Anti-F1 operon positive regulatory protein(CT)  肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體（C端）

天青I 94%烯酸, GR,>99.5%(GC)Anti-intestinal FABP/IFABP  腸型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體

天青Ⅱ Biological stain烯酸丁酯 AR,99%Anti-FABP(brain) CT  腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體(C端)

球型芽孢桿菌焦 AR,99%大鼠乙酰酯(AChE)免疫試劑盒化gamma氨丁B型受體1抗體KLHL24  Kelch樣蛋白24抗體

焦 電鍍級(jí)大鼠乙酰受體抗體(AChRab)免疫試劑盒化谷氨受體2抗體KLHL23  Kelch樣蛋白23抗體

錫 三水合物 95%大鼠乙酰(Ach)免疫試劑盒化鳥(niǎo)苷調(diào)節(jié)蛋白12抗體KLHL22  Kelch樣蛋白22抗體

錫 三水合物 99.9% metals basis大鼠乙脫氫(ALDH)免疫試劑盒珠蛋白轉(zhuǎn)錄因子1抗體KLHL21  Kelch樣蛋白21抗體

錫鈉 AR,55.3% SnO2大鼠乙脫氫(ADH)免疫試劑盒過(guò)氧化3KLHL20  Kelch樣蛋白20抗體

化亞錫 CP，97%大鼠胰脂肪(PL)免疫試劑盒過(guò)氧化4抗體KLHL14  Kelch樣蛋白14抗體

化烯鈀(II)二聚物 Pd 58.2%大鼠胰高血糖素樣肽2(Glp-2)免疫試劑盒高爾體膜蛋白GP73抗體KLHL13  kelch樣蛋白13抗體

二羰乙酰酮銠 99%大鼠胰高血糖素樣肽1(Glp-1)免疫試劑盒G蛋白偶聯(lián)受體172B抗體KLHL11  Kelch樣蛋白11抗體

三膦醋鈀 Pd 14.2%大鼠胰高血糖素(GC)免疫試劑盒生發(fā)中心B淋巴相關(guān)蛋白2抗體KLHL10  Kelch樣蛋白10抗體

雙(乙)化鈀(II)  Pd 41.0%大鼠胰多肽 免疫試劑盒G蛋白轉(zhuǎn)錄因子α3抗體KLHDC9  KLHDC9蛋白抗體

[1,3-雙（二膦）烷]二化鈀 Pd 18%大鼠胰淀素(Amylin)免疫試劑盒G蛋白偶聯(lián)受體124抗體（腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)記物）KLHDC8A  KLHDC8A蛋白抗體

二()二化鈀  Pd 27.7%大鼠胰淀粉α2A(AMY2A)免疫試劑盒半糖凝集素1抗體KLHDC5  kelch樣蛋白5抗體

二(三-t-丁膦)鈀(0) Pd 20.8%大鼠胰島抗體(ICA)免疫試劑盒α葡萄糖苷2抗體KLH  血藍(lán)蛋白抗體

反式-雙(三膦)合化羰銠(Ⅰ) Rh 14.91%大鼠胰島素自身抗體(IAA)免疫試劑盒半糖凝集素7抗體KLH  血藍(lán)蛋白抗體

雙(1,5-環(huán)辛二烯)四氟銠 Rh 25.3% 大鼠胰島素原(PI)免疫試劑盒特異性囊腫病液體蛋白15抗體KLF9/BTEB1  轉(zhuǎn)錄因子KLF9抗體

操作步驟如下：

1 液體石蠟的準(zhǔn)備 選用優(yōu)質(zhì)化學(xué)純液體石蠟，將液體石蠟分裝加塞，用牛皮紙包好，采用以下兩種方式進(jìn)行滅菌：121℃濕熱滅菌30min，置40℃恒溫箱中蒸發(fā)水分，經(jīng)無(wú)菌檢查后備用。160℃干熱滅菌2個(gè)小時(shí)，冷卻后，經(jīng)無(wú)菌檢查后備用。

2 斜面培養(yǎng)物的制備   參照定期移植法。

3 灌注石蠟  將無(wú)菌的液體石蠟在無(wú)菌條件*入培養(yǎng)好的新鮮斜面培養(yǎng)物上,液面高出斜面頂部1cm左右，使菌體與空氣隔絕。

4 保藏 4.1　注入液體石蠟的菌種斜面以直立狀態(tài)置低溫（4～6℃）干燥處保藏，保藏時(shí)間2～10年。 4.2　保藏期間應(yīng)定期檢查，如培養(yǎng)基露出液面，應(yīng)及時(shí)補(bǔ)充無(wú)菌的液體石蠟。

5 恢復(fù)培養(yǎng)   恢復(fù)培養(yǎng)時(shí)，挑取少量菌體轉(zhuǎn)接在適宜的新鮮培養(yǎng)基上，生長(zhǎng)繁殖后，再重新轉(zhuǎn)接一次。