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英文簡稱：NCI-H446細(xì)胞    

產(chǎn)品名稱：小細(xì)胞肺癌細(xì)胞；NCI-H446

規(guī)格：T25

形態(tài)特性：上皮樣

生長特性：貼壁/懸浮生長，混合

特征特性：該細(xì)胞是1982年由CarneyD和GazdarAF等從一位小細(xì)胞肺癌患者的胸腔積液中建立的。細(xì)胞的原始形態(tài)并不具有小細(xì)胞肺癌特征。這個細(xì)胞株是小細(xì)胞肺癌的生化和形態(tài)學(xué)上的變種，表達(dá)神經(jīng)元*的烯醇酶和腦型肌酸激酶同工酶；脫羧酶、蠶素、抗利尿激素、催產(chǎn)素或胃泌激素釋放肽未達(dá)到可檢測水平。與正常細(xì)胞相比，該細(xì)胞CS-mycDNA序列擴(kuò)增約20倍，RNA增加15倍。最初傳代培養(yǎng)基用含有5%FBS的RPMI1640，另外添加10nM氫化可的、0.005mg/ml胰島素、0.01mg/ml轉(zhuǎn)鐵

培養(yǎng)條件：RPMI1640+20%FBS

傳代方法：1：2傳代

貨號：CS-X63239
公司產(chǎn)品僅用于科研公司有大量的優(yōu)質(zhì)細(xì)胞，還提供細(xì)胞的全程后期服務(wù)，可以向?qū)I(yè)人士咨詢詳細(xì)的細(xì)胞培養(yǎng)條件，凍存方法，及相關(guān)培養(yǎng)技術(shù)。

運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)范：

主要功能：
（1）血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
（2）表達(dá)鈣通道及ICAM-1和VCAM-1，參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
（3）與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。
生理變化：
（1）主動脈硬化。
（2）主動脈瘤
（3）主動脈鈣化。
基本特性：
（1）組織來源于正常大鼠大動脈組織。
（2）鑒定：肌動蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
（3）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（4）每凍存管細(xì)胞數(shù)：>5×105 cells/1ml。
（5）肌動蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗證。
（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5-(2-羥乙)氨鄰疣孢漆斑菌拉丁屬名: T.longipile

2,6-二-3-(三氟)吡啶長毛木霉注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

2,6-二-3-(三氟)吡啶粉紅單端孢霉注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

原卟啉新平7317（平菇類）拉丁屬名: Escherichia coli

原卟啉大腸埃希氏菌用途: 昆蟲防治研究

5-氨-2-吡啶金龜子綠僵菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

煙酰肼白齒菌拉丁屬名: Pestalotiopsis vismiae

煙酰肼韋司梅擬盤多毛孢 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

苯鋰暗擬莖點霉拉丁屬名: Cellulomonas  sp.

苯鋰?yán)w維単胞菌拉丁屬名: Mucor racemosus

苯乙砜總狀毛霉拉丁屬名: Rhizopus  oryzae

苯乙砜米根霉拉丁屬名: Streptococcus  thermophilus

苯乙砜嗜熱鏈球菌拉丁屬名: Tolypocladium  inflatum

2-乙苯硫膨大彎頸霉拉丁屬名: Bacillus  cereus

2-乙苯硫蠟狀芽孢桿菌拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

9-溴-1-壬釀酒酵母拉丁屬名: Escherichia coli
NCI-H446細(xì)胞失水蘋果酰肼

順二酰肼

五氟苯肼

鹽肼

異酞酰二肼

1--3-硝-1-亞硝胍

N-亞硝胍

磺胍

硫胍
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡，co2孵箱。
1.2 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時，用0.25%消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率指數(shù)生的細(xì)胞，以0.25％消化成單細(xì)胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線。