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上海莼試生物技術(shù)有限公司

主營(yíng)產(chǎn)品: ELISA試劑盒,ELISA試劑盒價(jià)格,ELISA試劑盒報(bào)價(jià)

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包納米蟲(chóng)(Bona)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)ǎ┦褂梅椒?/h3>

2020-3-27  閱讀(153)

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【詳細(xì)說(shuō)明】

包納米蟲(chóng)(Bona)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)ǎ┱f(shuō)明書(shū)


產(chǎn)品僅用于科研產(chǎn)品名稱(chēng):包納米蟲(chóng)(Bona)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)ǎ?/strong>

規(guī)格:48T 0.1PCR管/48T 0.2PCR管
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
 

使用方法:

一、樣品 RNA 的制備

1、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout

2、或柱式病毒 RNAout。

二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成 cDNA

1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系(20 μL 體系)

2.包納米蟲(chóng)(Bona)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)ǎ?/strong> 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。

3. 嚴(yán)格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),

反應(yīng)終體積為 20μL。

4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。

5. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。

 

包納米蟲(chóng)(Bona)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)ǎ?/strong>實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):

1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;

2)客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào);

3)客戶(hù)盡量不要提供DNA或RNA樣品。

4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi),探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。

主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。

主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。