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α酮戊二酸脫氫酶(α-KGDH)測定步驟

2021-8-26  閱讀(726)

α酮戊二酸脫氫酶(α-KGDH)測定步驟:

1、 分光光度計或酶標儀預熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長至 340nm,蒸餾水調(diào)零。

2、 樣本測定

(1)在試劑五中加入 18mL 試劑四充分溶解,置于 37℃(哺乳動物)或 25℃(其它物種)

水浴 10min;現(xiàn)配現(xiàn)用;

(2)在試劑六中加入 1mL 蒸餾水,充分溶解待用;現(xiàn)配現(xiàn)用;

(3)在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μL 樣本、10μL 試劑六和 180μL 試劑五,混

勻,立即記錄 340nm 處 20s 時的吸光值 A1 和 2min20s 后的吸光值 A2,計算 ΔA=A2-A1。

測定原理

α-KGDH 催化 α-酮戊二酸、NAD+ 和輔酶 A 生成琥珀酰輔酶 A、二氧化碳和 NADH,NADH

在 340 nm 有特征吸收峰,以 NADH 的生成速率表示 α-KGDH 活性。

需自備的儀器和用品

紫外分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、

研缽、冰和蒸餾水。

磷酸化動力相關蛋白1抗體

DNA連接酶4抗體

二肽基肽酶6抗體

二氫還原酶抗體

有絲分裂控制樣蛋白DIS3L抗體

有絲分裂控制蛋白樣DIS3L2抗體

DOM3Z蛋白抗體

蓬亂蛋白2抗體

磷酸化蓬亂蛋白2抗體

轉(zhuǎn)錄下調(diào)蛋白1抗體

脫氫酶/還原酶家族成員2抗體

牙本質(zhì)磷蛋白抗體

Dermokine β蛋白抗體

DPCR1蛋白抗體

表皮乳頭源性蛋白6抗體

雙特異性蛋白磷酸酶7抗體

雙特異性蛋白磷酸酶26抗體

阿米洛利結(jié)合蛋白1抗體

S期激酶活化蛋白DBF4A抗體

著絲粒相關蛋白DSN1抗體

雙皮層蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白DCDC2抗體

神經(jīng)干細胞樹突調(diào)節(jié)蛋白DAGLα抗體

對接蛋白4抗體

DULLARD蛋白抗體

/蛋白激酶MNB抗體

無胸腺癥相關蛋白DGCR6/迪格奧爾格綜合征關鍵基因6抗體

朊蛋白DPL抗體

肌強直性營養(yǎng)不良蛋白激酶抗體

有絲分裂控制蛋白dis3抗體




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