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上海莼試生物技術有限公司

主營產(chǎn)品: ELISA試劑盒,ELISA試劑盒價格,ELISA試劑盒報價

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ELISA試劑盒:牛(choline)試劑盒操作步驟

2019-4-29  閱讀(195)

ELISA試劑盒:牛(choline)試劑盒操作步驟

1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀

釋。

160ng/L5號標準品150µl的原倍標準品加入150µl標準品稀釋液

80ng/L4號標準品150µl的5號標準品加入150µl標準品稀釋液

40ng/L3號標準品150µl的4號標準品加入150µl標準品稀釋液

20ng/L2號標準品150µl的3號標準品加入150µl標準品稀釋液

10ng/L1號標準品150µl的2號標準品加入150µl標準品稀釋液

2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、

待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40µl,

然后再加待測樣品10µl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡

量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此

重復5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶標試劑50µl,空白孔除外。

7.溫育:操作同3。

8.洗滌:操作同5。

9.顯色:每孔先加入顯色劑A50µl,再加入顯色劑B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色

10分鐘.

10.終止:每孔加終止液50µl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止

液后15分鐘以內(nèi)進行。

操作程序總結(jié):

計算

以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的

OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標

準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),

即為樣品的實際濃度。



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