人羊膜細(xì)胞WISH細(xì)胞
形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: zui初以為這株細(xì)胞的起源是正常羊膜,但隨后通過同工酶分析、HeLa標(biāo)記染色體和DNA指紋法分析,證實(shí)該細(xì)胞是HeLa細(xì)胞污染的;角蛋白陽(yáng)性。
培養(yǎng)條件: DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
人羊膜細(xì)胞WISH細(xì)胞傳代方法: 1:2~1:10傳代;每周換液2次。
傳代情況: P180
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) : 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:9,10;D13S317:13.3;D16S539:9,10;D18S51:16;D19S433:13,14;D21S11:27,28;D2S1338:17;D3S1358:15,18;D5S818:11,12;D7S820:8,12;D8S1179:12,13;FGA:21;TH01:7;TPOX:8,12;vWA:16,18;
染色體 : 70~75,有若干變異染色體
使用權(quán)限 : A類
人羊膜細(xì)胞WISH細(xì)胞預(yù)防細(xì)胞污染的注意事項(xiàng)
1)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前,超凈臺(tái)用紫外燈照射30~60min,然后用75%酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面,并開啟超凈臺(tái)風(fēng)機(jī)運(yùn)轉(zhuǎn)20min左右再開始實(shí)驗(yàn)操作。
2)實(shí)驗(yàn)用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺(tái)內(nèi);實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)移出超凈臺(tái),以利于氣流的流通。實(shí)驗(yàn)完成后用75%酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面。
3)每次操作只處理一種細(xì)胞;即使不同細(xì)胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基,避免細(xì)胞間的交叉污染。
4)操作時(shí)小心取用無菌的物品,避免污染。勿碰觸吸管尖頭,不小心碰觸后應(yīng)立即更換;不要在打開的容器瓶口正上方操作,容器打開后,傾斜45°操作,操作完成后及時(shí)蓋上瓶蓋。
5)CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方,應(yīng)1~2個(gè)月對(duì)培養(yǎng)箱定期進(jìn)行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁、隔板、水盤2~3次,用雙蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,zui后紫外燈照射4h以上。水盤內(nèi)加入無菌水(應(yīng)每周更換),待培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細(xì)胞。
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