大鼠視網(wǎng)膜血管瘤腫瘤抑制因子(vHL)ELISA試劑盒深圳子科所有ELISA系列試劑盒當(dāng)?shù)乜蛻艨梢杂蓪ｉT配送人員免費(fèi)送貨上門貨快遞，外地客戶當(dāng)天下單當(dāng)天免費(fèi)快遞送貨上門。我司試劑盒所有組份做過(guò)42度 7天破壞實(shí)驗(yàn)，產(chǎn)品效價(jià)降低幅度不超過(guò)7%，能確保運(yùn)輸過(guò)程中的溫度變化不會(huì)對(duì)試劑盒造成效價(jià)影響 。

樣品收集、處理及保存方法： 
1、 血清：操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000
×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2、 血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細(xì)胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。 
4、 組織勻漿：將組織加入適量理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液。 
5、 保存方法：如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 

大鼠視網(wǎng)膜血管瘤腫瘤抑制因子(vHL)ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng)： 
1、 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
2、 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
3、 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4、 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。 
5、 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。 
6、 底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。 
7、加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
8、按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。 

大鼠視網(wǎng)膜血管瘤腫瘤抑制因子(vHL)ELISA試劑盒詳細(xì)操作步驟如下： 
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。 
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL； 
3. 樣本孔先加待測(cè)樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。 6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。 
7. 每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。 結(jié)果判斷：繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：在Excel工作表中，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)OD值作縱坐標(biāo)，繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線，按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。

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