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中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)試劑盒的組成

2015年09月09日 09:30:52人氣:747來源:上海紀(jì)寧實(shí)業(yè)有限公司

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關(guān) 鍵 詞中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)試劑盒
【資料簡介】

使用中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)試劑盒前*閱讀說明書。本酶聯(lián)免疫試劑盒是基于經(jīng)典酶聯(lián)夾心技術(shù)原理,能測量人體NGAL,只能用于研究用途,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。

【檢測范圍】:1000pg/ml→15.6pg/ml。
【敏感性】: <3pg/ml
【特異性】: 系統(tǒng)和其它因子無交叉反應(yīng)。
【保存】: -20℃ [短期內(nèi)(如兩周)可4℃]
【有效期】: 12個(gè)月(-20℃)。
【用途】: 用于體外定量分析液體標(biāo)本(通用型)。

中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)試劑盒每套試劑盒中內(nèi)容】(96T)
材料 數(shù)量
人NGAL標(biāo)準(zhǔn)品 96T(2vial)
預(yù)包被人NGAL抗體的96孔板 96T(8×12)
生物素標(biāo)記人NGAL抗體 96T (1:100)
ABC(親和素-過氧化物酶復(fù)合物) 96T (1:100)
樣品稀釋液 96T×2
人NGAL抗體稀釋液 96T×1
ABC稀釋液 96T×1
TMB顯色液A 96T×1
TMB顯色液B 96T×1
TMB終止液 96T×1
ELISA洗滌液 96T×1(1:25)

中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)試劑盒需要而未提供的試劑和器材】
1. 37℃恒溫箱。
2. 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。
3. 自動(dòng)洗板機(jī)。
4. 單通道或多通道可調(diào)節(jié)移液器以及其吸頭。
5. 蒸餾水,容量瓶等
6. 干凈的試管和Eppendof管。

中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)試劑盒注意事項(xiàng)】
1. 從-20℃取出的試劑盒,在4℃解凍過夜。盒內(nèi)每一瓶解凍的溶液在開啟瓶蓋之前都要輕輕搖勻,避免解凍時(shí)出現(xiàn)的分層,否則會(huì)出現(xiàn)濃度不均一的現(xiàn)象。
2. 開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。
3. 配制各種試劑時(shí),切記混勻!
4. 用戶在初次使用試劑盒時(shí),應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘,以便試劑集中到管底。
5. 建議所有人NGAL標(biāo)準(zhǔn)品、樣本都做雙份檢測。
6. 要嚴(yán)格避免操作過程中酶標(biāo)板干燥。干燥會(huì)使酶標(biāo)板上生物成份迅速失活!
7. 為免交叉污染,要避免重復(fù)使用手中的吸頭和試管。

中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)試劑盒洗板方法】
手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的PBS或TBS洗滌緩沖液至少0.35ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。
自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。

中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)試劑盒樣品的準(zhǔn)備和保存】
樣品如果不立即分析,應(yīng)分裝后冷凍保存,且避免反復(fù)凍融。
血清——用干凈試管收集血液,室溫凝固2小時(shí)或4℃過夜,離心1000×g 10分鐘,收集血清。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
細(xì)胞培養(yǎng)、組織勻漿、體液——離心去除沉淀,立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。

中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)試劑盒工作原理】
NGAL(Neutrophil gelatinase associated lipocalin),中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白,是lipocalin家族的新成員,是脂質(zhì)運(yùn)載蛋白家族的一個(gè)新成員,它是腎功能損傷早期的生物標(biāo)志物。NGAL是鐵粒子鰲和/轉(zhuǎn)運(yùn)體,急性腎小管損傷早期表達(dá)。雖然結(jié)構(gòu)尚不清,但被認(rèn)為參與缺血再灌注損傷修復(fù)過程,可能與腎小管內(nèi)皮再生有關(guān)。zui近研究表明NGAL是腎損傷的敏感指標(biāo)。對腎移植病人的研究表明尿中NGAL和白介素18(IL-18)增加可預(yù)測移植腎功能恢復(fù)延遲,而且比血清肌酐增加的預(yù)測作用快近24小時(shí)。對心臟手術(shù)病人前瞻性研究發(fā)現(xiàn)術(shù)后1小時(shí)尿NGAL明顯增加。研究表明NGAL可能與炎癥反應(yīng)、腫瘤發(fā)展、腎臟疾病有一定關(guān)系。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預(yù)先包被的人NGAL抗體為多克隆人NGAL抗體。檢測相人NGAL抗體也為多克隆人NGAL抗體,經(jīng)生物素(biotin)標(biāo)記。樣品和生物素標(biāo)記人NGAL抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng);經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。

上海紀(jì)寧實(shí)業(yè)有限公司作者

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