血漿游離血紅蛋白測(cè)定

【資料簡(jiǎn)介】

實(shí)驗(yàn)原理
 
血紅蛋白具有類過(guò)氧化物酶活性，可催化H2O2釋放新生態(tài)氧，使鄰甲聯(lián)苯胺氧化發(fā)生顏色變化，由無(wú)色zui終變?yōu)樗{(lán)紫色。根據(jù)顯色深淺與標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較，可測(cè)出其含量。
 
實(shí)驗(yàn)方法
 
材料：
 
1．2g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液
 
2．1%H2O2
 
3．10%醋酸溶液
 
4．分光光度計(jì)
 
方法：
 
1.抽取靜脈血2-3ml，*抗凝，離心分離血漿。
 
2．按下表進(jìn)行操作，用分光光度計(jì)，波長(zhǎng)為530nm，以空白管調(diào)零，測(cè)定測(cè)定管的吸光度。

試劑 （ml）	測(cè)定管	空白管
2 g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液	0.5	0.5
患者血漿	0.02	/
1% H2O2	0.5	0.5
混勻后室溫放置10min
10%醋酸溶液	5.0	5.0
室溫放置10min

3.計(jì)算公式
 
血漿游離Hb(mg/L)=測(cè)定管吸光度/標(biāo)準(zhǔn)管吸光度×100
 
實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算
 
參考范圍：0-40mg/L
 
注意事項(xiàng)
 
1.一切容器避免血紅蛋白污染；
 
2.采血要順利，器皿要干燥，檢測(cè)血漿要新鮮，及時(shí)分離，防止人為溶血；
 
3.鄰聯(lián)苯胺溶液具致癌性，檢測(cè)時(shí)要小心，廢液要妥善處理，以免污染；
 
4.雙氧水要新鮮配置，濃度要準(zhǔn)確。