ELISA檢測試劑盒的檢測速度和靈敏度

【資料簡介】

    ELISA檢測試劑盒試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。ELISA檢測試劑盒的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。

    此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。因?yàn)槊傅拇呋屎芨撸g接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測定方法達(dá)到很高的敏感度。在測定時，受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，ELISA檢測試劑盒酶標(biāo)記的抗原或抗體既留存其免疫學(xué)活性，又留存酶的活性。在選購酶標(biāo)儀的時候，我們會首先面臨一個選擇，濾光片還是光柵？酶標(biāo)儀主要分為濾光片型和光柵型，分別以兩種不同方式生成特定波長的激發(fā)光，一種是通過濾光片，一種是通過單色器（包括光柵和棱鏡）。對于我們使用者來說，這兩種酶標(biāo)儀究竟有何區(qū)別呢？

    因此濾光片型酶標(biāo)儀一般要比光柵型酶標(biāo)儀靈敏。此外，濾光片能夠?qū)崿F(xiàn)快速的波長轉(zhuǎn)換，很適合離子通道比率分析以及雙信號快速動力學(xué)分析等。濾光片的配置決定了酶標(biāo)儀所能使用的波長，我們更改實(shí)驗(yàn)波長就是在切換濾光片。ELISA檢測試劑盒濾光片型酶標(biāo)儀一般要比光柵型便宜一些，如果我們需要的波長比較固定，對靈敏度又有較高要求，那么濾光片型酶標(biāo)儀無疑是*選擇。若是日后想要應(yīng)用其他波長，還需另外購買濾光片，要是需添置的波長多就不大合算了。所以在我們出手之前一定要先想好未來可能進(jìn)行的各項(xiàng)研究，謀定而后動。
     目前市面上的光柵型酶標(biāo)儀其實(shí)比濾光片型更為普遍，這是因?yàn)楣鈻趴梢造`活設(shè)置波長，就算臨時開展新研究也不用專門去買濾光片。而且如果我們要用未知染料進(jìn)行檢測，或是需要自定義波長和光譜掃描，就只能選光柵型酶標(biāo)儀。此外，光柵在近紫外區(qū)的檢測效率也更高（如色氨酸熒光檢測）。zui先推出光柵型酶標(biāo)儀的是MD公司（Molecular Devices），ELISA檢測試劑盒MD酶標(biāo)儀采用一個光柵和一個濾片濾光的單光柵系統(tǒng)。后來又出現(xiàn)了兩個光柵組成的濾光系統(tǒng)，例如PE、TECAN、Thermo、BioTek等公司的一些產(chǎn)品，這類系統(tǒng)由于激發(fā)和發(fā)射各用兩個光柵也被稱為四光柵系統(tǒng)。
總的來說，如果實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用很多需要多種波長，那么選擇靈活方便的光柵型酶標(biāo)儀準(zhǔn)沒錯。若是應(yīng)用比較單一但對靈敏度要求高，物美價廉的濾光片型酶標(biāo)儀就相當(dāng)貼心。此外，還有BioTek公司的Hybrid Technology系統(tǒng)，該系統(tǒng)將濾光片和單色器組合起來，想用濾光片時選濾光片，想用光柵時選光柵，就是這么簡單。
適合的才是的
    不論我們買什么，適合自己的才是的，選擇酶標(biāo)儀時也是如此。酶標(biāo)儀性能指標(biāo)包括測定波長范圍、濾光片配置、檢測速度、吸光度范圍、線性范圍、分辨率、準(zhǔn)確度、精密度等。
對于一般生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)室來說，酶標(biāo)儀主要可用于基因表達(dá)、信號傳導(dǎo)、ELISA、蛋白和核酸定量、細(xì)胞活性分析和免疫分析。如果要進(jìn)行細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)，ELISA檢測試劑盒酶標(biāo)儀一般要能夠底部讀取、微孔板掃描、并支持孵育和搖晃。而要做高通量篩選的實(shí)驗(yàn)室，就需要考慮到。高通量篩選可能涉及到特殊篩選溶液、更低的檢測限以及大量微孔板。在選擇酶標(biāo)儀時除了要關(guān)注可靠性、靈敏度和一致性以外，能否對微孔板所有孔進(jìn)行同時檢測也是不可忽視的考量因素。