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技術(shù)中心

真菌/酵母細(xì)胞β1,3- D-葡聚糖合成酶活性定量檢測說明書

2015年04月17日 11:45:33人氣:1930來源:上海哈靈生物科技有限公司

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關(guān) 鍵 詞化學(xué)試劑,生物試劑,抗體試劑,植物試劑盒
【資料簡介】

主要用途
真菌/酵母細(xì)胞β1,3- D-葡聚糖合成酶活性定量檢測試劑是一種旨在通過β1,3- D-葡聚糖合成酶反應(yīng)系統(tǒng)中尿嘧啶核苷-5’-二磷酸葡萄糖底物聚合成葡聚糖,與熒光染料結(jié)合產(chǎn)生熒光峰值的變化,來測定樣品中酶活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種真菌或酵母細(xì)胞株裂解懸液中β1,3- D-葡聚糖合成酶的活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,具有高通量特點。
技術(shù)背景
真菌/酵母細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)具有豐富的糖蛋白外層和碳水化合物內(nèi)層,包括(1,3)-β-D,(1,6)-β-D和(1,3)-α-D-葡聚糖(glucan)。其中(1,3)-β-D為主要元素。1,3-β-D-葡聚糖合成酶(1,3-β-D-glucan synthase;GS;EC.2.4.1.34),又稱為尿嘧啶核苷-5’-二磷酸葡萄糖:1,3-β-葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶(UDP-glucose:1,3-β-glucosyl transferase),催化以尿嘧啶核苷-5’-二磷酸葡萄糖(UDP-glucose)為底物,通過1,3-β鏈接聚合為葡聚糖的反應(yīng),構(gòu)成真菌/酵母細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)中主要碳水化合物成分1,3-β-D-葡聚糖,為細(xì)胞生長所必需。1,3-β-D-葡聚糖合成酶具有兩種結(jié)構(gòu)體:1個調(diào)節(jié)亞體,GTPase Rho1p和4個催化亞體,Bgs1p-4p或Fksp。(1,3)-β-D-葡聚糖合成酶成為抗真菌藥物,例如卡泊芬凈(caspofungi)等的靶標(biāo)。基于底物UDP-glucose在葡聚糖合成酶的催化下,聚合成(1,3)-β-D-葡聚糖產(chǎn)物,與苯胺藍(lán)(Aniline blue;4,4-(carbonyl-bis(benzene-4,1- diyl)-bis-(imino)-bis-benzenesulfonic acid)反應(yīng)產(chǎn)生復(fù)合物,呈現(xiàn)熒光峰值的變化(激發(fā)波長400nm,散發(fā)波長460nm),由此定量測定β1,3- D-葡聚糖合成酶的活性。

上海哈靈生物科技有限公司作者

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