真菌/酵母細(xì)胞β1，3- D-葡聚糖合成酶活性定量檢測說明書

【資料簡介】

主要用途
真菌/酵母細(xì)胞β1，3- D-葡聚糖合成酶活性定量檢測試劑是一種旨在通過β1，3- D-葡聚糖合成酶反應(yīng)系統(tǒng)中尿嘧啶核苷-5’-二磷酸葡萄糖底物聚合成葡聚糖，與熒光染料結(jié)合產(chǎn)生熒光峰值的變化，來測定樣品中酶活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種真菌或酵母細(xì)胞株裂解懸液中β1，3- D-葡聚糖合成酶的活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，具有高通量特點。
技術(shù)背景
真菌/酵母細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)具有豐富的糖蛋白外層和碳水化合物內(nèi)層，包括（1,3）-β-D，（1,6）-β-D和（1,3）-α-D-葡聚糖（glucan）。其中（1,3）-β-D為主要元素。1,3-β-D-葡聚糖合成酶（1,3-β-D-glucan synthase；GS；EC.2.4.1.34），又稱為尿嘧啶核苷-5’-二磷酸葡萄糖：1,3-β-葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶（UDP-glucose：1,3-β-glucosyl transferase），催化以尿嘧啶核苷-5’-二磷酸葡萄糖（UDP-glucose）為底物，通過1,3-β鏈接聚合為葡聚糖的反應(yīng)，構(gòu)成真菌/酵母細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)中主要碳水化合物成分1,3-β-D-葡聚糖，為細(xì)胞生長所必需。1,3-β-D-葡聚糖合成酶具有兩種結(jié)構(gòu)體：1個調(diào)節(jié)亞體，GTPase Rho1p和4個催化亞體，Bgs1p－4p或Fksp。（1,3）-β-D-葡聚糖合成酶成為抗真菌藥物，例如卡泊芬凈（caspofungi）等的靶標(biāo)。基于底物UDP-glucose在葡聚糖合成酶的催化下，聚合成（1,3）-β-D－葡聚糖產(chǎn)物，與苯胺藍(lán)（Aniline blue；4,4-（carbonyl-bis（benzene-4,1- diyl）-bis-（imino）-bis-benzenesulfonic acid）反應(yīng)產(chǎn)生復(fù)合物，呈現(xiàn)熒光峰值的變化（激發(fā)波長400nm，散發(fā)波長460nm），由此定量測定β1，3- D-葡聚糖合成酶的活性。