從血液和組織中提取RNA的方法及其區(qū)別

【資料簡(jiǎn)介】

1、無(wú)菌采集靜脈血2 ml注入盛有2 ml Hank's液（含100 u/ml肝素）的試管中，混勻。

2、吸取淋巴細(xì)胞分層液2 ml加入離心管中，再將稀釋抗凝血液小心沿管壁加至分層液上，應(yīng)注意保持兩者界面清晰（關(guān)鍵）。

3、室溫2000 r/min離心20 min。管內(nèi)可分為四層。

4、將上層淡黃色的稀釋血漿取出于潔凈試管中-20 ℃保存。

5、用毛細(xì)吸管輕輕吸出乳白色的單個(gè)核細(xì)胞，加入另一支已含有2-5 mlHank's液的離心管中，混勻。

6、室溫下，1500rpm離心10min。

7、棄上清，重復(fù)洗滌一次。用*RPMI-1640 1 ml定容，計(jì)數(shù)細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞懸液至所需濃度：一般每ml血可分離出1-2×106個(gè)單個(gè)核細(xì)胞。

淋巴細(xì)胞分離出來(lái)以后取血和細(xì)胞就一樣的步驟了：加Trizol裂解細(xì)胞，之后進(jìn)行RNA的抽提