ELISA試劑盒的使用會(huì)造成膜蛋白結(jié)構(gòu)

【資料簡(jiǎn)介】

     目前在PDB里的絕大部分ELISA試劑盒膜蛋白結(jié)構(gòu)是在去垢劑的環(huán)境下測(cè)定的。它的各種聚集體包括寡聚體、原纖維和纖維與老年癡呆癥的病理密切相關(guān)，研究這些聚集體的三維結(jié)構(gòu)可以為揭示老年癡呆癥發(fā)生發(fā)展的機(jī)制提供分子結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。楊俊課題組解析得到了在磷脂雙層膜環(huán)境下的原子水平的Aβ纖維單體的三維結(jié)構(gòu)，ELISA試劑盒揭示了磷脂膜環(huán)境特別是磷脂極性頭的電荷性質(zhì)對(duì)Aβ纖維結(jié)構(gòu)的影響，提供了Aβ聚集的分子機(jī)制。因此在更接近DAGK的天然膜的環(huán)境下進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析有著更重要的意義。楊俊課題組利用高分辨的固體NMR多維譜得到了DAGK在接近天然膜環(huán)境的E.Coli膜上的二級(jí)結(jié)構(gòu)和拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)，通過對(duì)比三種去垢劑/磷脂膜環(huán)境中DAGK的二級(jí)結(jié)構(gòu)，他們發(fā)現(xiàn)在膜蛋白的結(jié)構(gòu)分析中去垢劑的失真。
    ELISA試劑盒磷脂膜還能影響淀粉樣蛋白的聚集機(jī)制。Aβ是一類具有39-42個(gè)氨基酸的多肽，所以但是在去垢劑的環(huán)境下的膜蛋白的結(jié)構(gòu)是不是在磷脂雙分子環(huán)境下的真實(shí)結(jié)構(gòu)是一個(gè)備受關(guān)注的問題。固體NMR因能夠在磷脂雙分子層的環(huán)境下解析膜蛋白的三維結(jié)構(gòu)而成為證實(shí)膜蛋白結(jié)構(gòu)真實(shí)性的重要工具。大腸桿菌甘油二脂激酶（DAGK）是一個(gè)重要的三跨膜蛋白，它的三維結(jié)構(gòu)已經(jīng)被液體核磁共振和X-射線晶體學(xué)的方法所解析。

    但是由于這兩種方法所用的去垢劑/磷脂膜不同，得到的結(jié)構(gòu)差別很大。這兩種方法都不是在DAGK的天然膜環(huán)境中進(jìn)行，因此在更接近DAGK的天然膜的環(huán)境下進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析有著更重要的意義。 ELISA試劑盒膜蛋白所處的磷脂膜/去垢劑環(huán)境對(duì)膜蛋白的結(jié)構(gòu)和功能有重要的影響。膜蛋白結(jié)構(gòu)測(cè)定手段如X-射線晶體學(xué)和液體NMR很難在磷脂雙分子膜的環(huán)境下研究膜蛋白的結(jié)構(gòu)，