人麻疹病毒（MV）說明書間接法

【資料簡介】

人 人人 人麻疹病毒 麻疹病毒 麻疹病毒 麻疹病毒（ （（ （MV） MV） MV） MV）酶聯(lián)免疫 酶聯(lián)免疫 酶聯(lián)免疫 酶聯(lián)免疫分析 分析 分析 分析（ （（ （ELISA） ）） ）     
試劑 試劑 試劑 試劑盒使用說明書 盒使用說明書 盒使用說明書 盒使用說明書     
本試劑盒僅供研究使用。
使用目的 使用目的 使用目的 使用目的： ：： ：
本試劑盒用于測定人血清，血漿及相關液體樣本中麻疹病毒  （MV）含量。
實驗原理 實驗原理 實驗原理 實驗原理
本試劑盒應用間接法測定標本中人麻疹病毒  （MV）水平。用純化的人麻疹病毒  （MV）抗
體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入已知濃度的麻疹病毒  （MV）
標準品和未知濃度的麻疹病毒  （MV）待檢樣品，溫育后，加入*標記的抗 IgG抗體，再
與鏈霉親和素-HRP 結合，形成免疫復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在
HRP 酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的
麻疹病毒  （MV）呈正相關。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度（OD 值），通過標準曲線
計算樣品中人麻疹病毒  （MV）濃度。  
試劑盒組成 試劑盒組成 試劑盒組成 試劑盒組成  
1  20 倍濃縮洗滌液  50ml×1 瓶  標準品 S1（160 IU/L）  0.5ml×1瓶
2  鏈霉親和素-HRP  6ml×1 瓶  標準品 S2（80 IU/L）  0.5ml×1瓶
3  酶標包被板  12孔×8條  標準品 S3（40IU/L）  0.5ml×1瓶
4  *標記的抗-IgG 抗體  6ml×1 瓶  標準品 S4（20 IU/L）  0.5ml×1瓶
5  顯色劑A 液  6ml×1 瓶
 
 
9
標準品 S5（10IU/L）  0.5ml×1瓶  
6  顯色劑 B液  6ml×1/瓶  10  密封袋  1 個
7  終止液  6ml×1 瓶  11  封板膜  3 張
8  樣品稀釋液  6ml×1 瓶  12  說明書  1 份
 
標本要求 標本要求 標本要求 標本要求  
1．不能檢測含NaN3的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
2．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
操作步驟 操作步驟 操作步驟 操作步驟
1.  根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復
孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔。
2.  加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品，其余各步操作相同）、標準品孔、待測樣
品孔。然后在標準品孔中加入標準品 50µl，在樣本反應孔中先加入待測樣品 10µl 再加
入樣品稀釋液 40µl（樣品zui終稀釋度為 5 倍），蓋上封板膜，輕輕振蕩混勻，37℃溫育
45 分鐘。
3.  配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
4.  洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此
重復 4次，拍干。
5.  加*標記的抗-IgG 抗體：每孔加入*標記的抗-IgG 抗體 50µl。37℃溫育 30 分
鐘 6.  洗滌：操作同 4。
7.  加鏈霉親和素-HRP：每孔加入 50µl 的鏈酶親和素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育 30
分鐘。
8.  洗滌：操作同 4。
9.  顯色：每孔先加入顯色劑A 50µl，再加入顯色劑B 50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液 50µl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。  測定應在加終止
液后 15 分鐘以內(nèi)進行。
 
計算 計算 計算 計算
    以標準物的濃度為橫坐標，OD 值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的
OD 值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD 值計算出標
準曲線的直線回歸方程式，將樣品的 OD值待入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，
即為樣品的實際濃度。  
注意事項 注意事項 注意事項 注意事項
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未
用完，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在 5 分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4． 如標本中待測物質含量過高（樣本 OD 值大于標準品孔*孔的 OD 值），請先將樣本
稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)（×5×n）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑 B請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.  如與英文說明書有異，以英文說明書為準。
線形 線形 線形 線形范圍 范圍 范圍 范圍： ：： ：
7.5IU/L-160IU/L
規(guī)格 規(guī)格 規(guī)格 規(guī)格： ：： ：
96 人份/盒
保存條件及有效期 保存條件及有效期 保存條件及有效期 保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6個月