大鼠腦膠質(zhì)瘤細胞 的實驗步驟

【資料簡介】

大鼠腦膠質(zhì)瘤細胞 操作步驟：

1 在無抗生素的培養(yǎng)基中消化、計數(shù)和稀釋細胞，稀釋到常規(guī)細胞傳代的濃度。
2 分散細胞懸液到多孔培養(yǎng)板中，或幾個小培養(yǎng)瓶中。在一個濃度梯度范圍內(nèi)，把選擇抗生素加入到每一個孔中。例如，下列濃度，0.25，0.50，1.0，2.0，4.0,8.0 mg/ml。
3 每天觀測細胞毒性指標，如脫落，出現(xiàn)空泡，匯合度下降和變圓。
4 確定抗生素毒性水平后，使用低于毒性濃度2－3倍濃度的抗生素的培養(yǎng)液培養(yǎng)細胞2－3代。
5 在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)細胞一代。
6 重復(fù)步驟4。
7 在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)4－6代，確定污染是否以已被消除。