人源細(xì)胞基本操作步驟

【資料簡(jiǎn)介】

人源細(xì)胞基本操作步驟
1、取1.5ml滅菌EP管，加入1.5μg包裝混合質(zhì)粒和0.5μg表達(dá)質(zhì)粒以及250μl的無(wú)血清培養(yǎng)基。輕柔混勻，室溫孵育5min。
2、取1.5ml滅菌EP管，取9μl 脂質(zhì)體2000l溶于250μl無(wú)血清培養(yǎng)基中。輕柔混勻，室溫孵育5min。
3、將DNA溶液和脂質(zhì)體溶液輕柔混勻。室溫孵育20min
4、用消化并記數(shù)293t細(xì)胞。用含血清的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。
5、在六孔板中每孔，加入1ml含血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基，再加入DNA-脂質(zhì)體復(fù)合物。
6、將1ml重懸的293T細(xì)胞(1×106個(gè)細(xì)胞/ml)加入到平板中。37℃CO2孵箱中孵育過(guò)夜。
7、進(jìn)口原裝ELISA試劑盒移除含有DNA-脂質(zhì)體復(fù)合物的培養(yǎng)基移除，代之以DMEM(含丙酮酸鈉和非必須氨基酸)。
7、轉(zhuǎn)染后48-72h收獲含病毒的上清。3000 rpm 離心20min，去除沉淀。
8、病毒上清-80°C貯存。
人源細(xì)胞10 µg 人生發(fā)基質(zhì)細(xì)胞總RNA HHGMC tRNA

10 µg 人外根殼細(xì)胞總RNA HHORSC tRNA

10 µg 人內(nèi)根殼細(xì)胞總RNA HHIRSC tRNA

10 µg 人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞總RNA HLEC tRNA

10 µg 人淋巴成纖維細(xì)胞總RNA HLF tRNA

10 µg 人口腔角質(zhì)細(xì)胞總RNA HOK tRNA

10 µg 人牙齦成纖維細(xì)胞總RNA HGF tRNA

10 µg 人牙周膜成纖維細(xì)胞總RNA HPLF tRNA

10 µg 人食道上皮細(xì)胞總RNA HEEpiC tRNA

10 µg 人食道平滑肌細(xì)胞總RNA HESMC tRNA

10 µg 人腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞總RNA HIMEC tRNA

10 µg 人腸平滑肌細(xì)胞總RNA HISMC tRNA

10 µg 人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞總RNA HCSMC tRNA

10 µg 人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞總RNA HPMEC tRNA

10 µg 人肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞總RNA HPAEC tRNA

10 µg 人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞總RNA HPASMC tRNA

10 µg 人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞總RNA HPAF tRNA

10 µg 人肺泡上皮細(xì)胞總RNA HPAEpiC tRNA

10 µg 人支氣管上皮細(xì)胞總RNA HBEpiC tRNA

10 µg 人氣管上皮細(xì)胞總RNA HTEpiC tRNA

10 µg 人小氣道上皮細(xì)胞總RNA HSAEpiC tRNA

10 µg 人肺成纖維細(xì)胞總RNA HPF tRNA

10 µg 人支氣管平滑肌細(xì)胞總RNA HBSMC tRNA

10 µg 人氣管平滑肌細(xì)胞總RNA HTSMC tRNA

10 µg 人骨骼肌細(xì)胞總RNA HSkMC tRNA

10 µg 人骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞總RNA HSkMSC tRNA

10 µg 人骨骼肌成肌細(xì)胞總RNA HSkMM tRNA

10 µg 人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞總RNA HRGEC tRNA

10 µg 人腎近曲小管上皮細(xì)胞總RNA HRPTEpiC tRNA

10 µg 人腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞總RNA HRCEpiC tRNA人源細(xì)胞