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伊紅染色

2011年05月17日 11:04:10人氣:2557來(lái)源:上海通蔚生物科技有限公司

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【資料簡(jiǎn)介】

蘇木精-伊紅染色

 

染液制備:
1. 蘇木精染液
(1) 稱取0.5g蘇木精、5.0g銨礬或鉀礬和0.1g碘酸鈉加溫溶于70ml蒸餾水中;
(2) 加入30ml甘油和2ml冰乙酸充分混勻后過(guò)濾即成母液;
(3) 母液可長(zhǎng)期保存。用蒸餾水以1:20稀釋母液即成工作液。工作液也較長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存,但每次染色前宜過(guò)濾,去除氧化膜;
2. 伊紅染液
伊紅有醇溶性與水溶性之分。將0.5g伊紅溶于100ml 70%乙醇或蒸餾水即成工作液;

染色步驟:
1. 用37℃的溫BSS漂洗3次,每次20s—1min;
2. 用中性福爾馬林固定30min;
3. 用蒸餾水漂洗1次,再用蒸餾水稀釋的蘇木精液(1/20)染10min;
4. 先用自來(lái)水沖洗幾次,而后置入1% NaHCO3液中漂洗至藍(lán)紫色;
5. 在放入伊紅水溶液中染30s—1min;
6. 用蒸餾水沖洗,迅速通過(guò)丙酮2次,每次3—5min;
7. 通過(guò)2:1丙酮/二甲苯3次,每次1—2min;
8. 通過(guò)1:2丙酮/二甲苯3次,每次1—2min;
9. 放入純二甲苯5—10min,用光學(xué)樹脂封片后觀察;
10. 把蓋片置載物玻片上,令小蓋片細(xì)胞面向上,用樹膠封存,再覆以較大蓋片;

結(jié)果:
原代細(xì)胞核染成紅色,胞質(zhì)染成藍(lán)紫色;
 


 

上海通蔚生物科技有限公司作者

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