伊紅染色

【資料簡(jiǎn)介】

蘇木精-伊紅染色

 

染液制備：
1. 蘇木精染液
（1） 稱取0.5g蘇木精、5.0g銨礬或鉀礬和0.1g碘酸鈉加溫溶于70ml蒸餾水中；
（2） 加入30ml甘油和2ml冰乙酸充分混勻后過(guò)濾即成母液；
（3） 母液可長(zhǎng)期保存。用蒸餾水以1：20稀釋母液即成工作液。工作液也較長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存，但每次染色前宜過(guò)濾，去除氧化膜；
2. 伊紅染液
伊紅有醇溶性與水溶性之分。將0.5g伊紅溶于100ml 70%乙醇或蒸餾水即成工作液；

染色步驟：
1. 用37℃的溫BSS漂洗3次，每次20s—1min；
2. 用中性福爾馬林固定30min；
3. 用蒸餾水漂洗1次，再用蒸餾水稀釋的蘇木精液（1/20）染10min；
4. 先用自來(lái)水沖洗幾次，而后置入1% NaHCO3液中漂洗至藍(lán)紫色；
5. 在放入伊紅水溶液中染30s—1min；
6. 用蒸餾水沖洗，迅速通過(guò)丙酮2次，每次3—5min；
7. 通過(guò)2：1丙酮/二甲苯3次，每次1—2min；
8. 通過(guò)1：2丙酮/二甲苯3次，每次1—2min；
9. 放入純二甲苯5—10min，用光學(xué)樹脂封片后觀察；
10. 把蓋片置載物玻片上，令小蓋片細(xì)胞面向上，用樹膠封存，再覆以較大蓋片；

結(jié)果：
原代細(xì)胞核染成紅色，胞質(zhì)染成藍(lán)紫色；