人流行性出血熱抗體（EHF-Ab）酶聯(lián)免疫分析試劑盒組成及操作步驟

【資料簡(jiǎn)介】

人流行性出血熱抗體（EHF-Ab）酶聯(lián)免疫分析試劑盒組成

 

1 20倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶 7 終止液 3ml×1瓶
2 酶標(biāo)試劑 3ml×1瓶 8 陽(yáng)性對(duì)照 0.5ml×1瓶
3 酶標(biāo)包被板 12孔×4條 9 陰性對(duì)照 0.5ml×1瓶
4 樣品稀釋液 3ml×1瓶 10 說(shuō)明書 1份
5 顯色劑A液 3ml×1瓶 11 封板膜 2張
6 顯色劑B液 3ml×1/瓶 12 密封袋 1個(gè)

 

人流行性出血熱抗體（EHF-Ab）酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作步驟

 

1.         編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照2孔、陽(yáng)性對(duì)照2孔、空白對(duì)照1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）

2.         加樣：分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照50μl。然后在待測(cè)樣品孔先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，

3.         溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  

4.         配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用

5.         洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6.         加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7.         溫育：操作同3。

8.         洗滌：操作同5。

9.         顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10.     終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11.     測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。