大鼠磷酸化AKT蛋白（P-AKT）Elisa試劑盒使用說明書

【資料簡介】

大鼠磷酸化AKT蛋白（P-AKT）Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠磷酸化 AKT 蛋白（P-AKT）水平。用純化
的大鼠磷酸化 AKT 蛋白（P-AKT）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入磷酸化AKT 蛋白（P-AKT） ，再與HRP 標(biāo)記的磷酸化AKT 蛋白（P-AKT）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的磷酸化AKT 蛋白（P-AKT）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠磷酸化AKT 蛋白（P-AKT）濃度
大鼠磷酸化AKT蛋白（P-AKT）Elisa試劑盒操作步驟 
1.  標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 
80ng/L  5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品  150µl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
40ng/L  4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品  150µl的5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
20ng/L  3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品  150µl的4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
10ng/L  2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品  150µl的3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
5ng/L  1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品  150µl的2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同） 、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。 在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50µl， 待測樣品孔中先加樣品稀釋液40µl，
然后再加待測樣品10µl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡
量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。 
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。     
4. 配液：將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用 
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此重復(fù) 5次，拍干。 
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50µl，空白孔除外。   
7. 溫育：操作同3。 
8. 洗滌：操作同5。 
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50µl，再加入顯色劑B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15 分鐘. 
10. 終止：每孔加終止液 50µl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色） 。 
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD 值） 。 測定應(yīng)在加終止液后 15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
人胰腺癌標(biāo)志物CA242ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    英文名稱：    Human Pancreatic carcinoma markers-CA242 ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒    進(jìn)口/原裝    英文名稱：    Human Gastrointestinalcancer Marker-CA199 ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA試劑盒    *    英文名稱：    Human ovarian cancer marker-CA125 ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    英文名稱：    Human Alpha-fetoprotein，AFP ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA試劑盒    進(jìn)口/原裝    英文名稱：    Human tissue inhibitors of metalloproteinase 4，TIMP-4 ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA試劑盒    *    英文名稱：    Human tissue inhibitors of metalloproteinase 3，TIMP-3 ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA試劑盒    *    英文名稱：    Human tissue inhibitors of metalloproteinase 2，TIMP-2 ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    英文名稱：    Human Oncostatin-M，OSM ELISA Kit     規(guī)格:    96T/48T
人表面活性蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒     進(jìn)口/原裝    英文名稱：    Human Surfactant Protein A，SP-A ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒    *    英文名稱：    Human Pulmonary surfatcant-associated protein A，SP-A ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人轉(zhuǎn)酶2C多肽(TGM2)ELISA試劑盒    *    英文名稱：    human tranGSlutaminase 2C polypeptide，TGM2 ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    英文名稱：    Human procollagen Ⅰ N-terminal peptide，PⅠNP ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒    進(jìn)口/原裝    英文名稱：    Human Cross-linked Carboxy-terminal opeptide of type Ⅰ collagen，ⅠCTP ELISA Kit    大鼠磷酸化AKT蛋白（P-AKT）Elisa試劑盒規(guī)格:    96T/48T