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ELISA實驗中試劑的配置

時間:2013-7-11閱讀:614
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ELISA實驗中是以抗原和抗體的免疫反應為基礎(chǔ),ELISA試劑以及各種溶液如何配置?各種ELISA配置方法匯總?cè)缦拢海?)ELISA實驗包被緩沖液(2) ELISA實驗洗滌緩沖液(3)ELISA實驗洗滌緩沖液(4)ELISA實驗稀釋液;(5)ELISA實驗終止液(6)ELISA底物緩沖液(7)ELISA實驗TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液(8)ELISA實驗ABTS使用液。
試劑
(1) ELISA實驗包被緩沖液(PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液):
NaHCO3    1.59克
NaHCO3  2.93克
加蒸餾水至1000ml
(2) ELISA實驗洗滌緩沖液(PH7.4 PBS):0.15M
KH2PO4        0.2克
Na2HPO4•12H2O  2.9克
NaCl         8.0克
KCl        0.2克
Tween-20 0.05%  0.5ml
加蒸餾水至1000ml
(3) ELISA實驗稀釋液:
牛血清白蛋白(BSA) 0.1克
加洗滌緩沖液至100ml
或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5~10%使用。
(4) ELISA實驗終止液(2M H2SO4):
蒸餾水178.3ml,逐滴加入濃硫酸(98%)21.7ml。
(5) ELISA底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):
0.2M Na2HPO4(28.4克/L)          25.7ml
0.1M 檸檬酸(19.2克/L)      24.3ml
加蒸餾水                        50ml。
(6) ELISA實驗TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液:
TMB(10mg/5ml無水乙醇)   0.5ml
底物緩沖液(PH5.5)      10ml
0.75%H2O2             32μl
(7) ELISA實驗ABTS使用液:
ABTS        0.5mg
底物緩沖液(PH5.5)     1ml
3%H2O2               2μl
(8)ELISA實驗封閉液:
牛血清白蛋白(BSA) 5克
加洗滌緩沖液至100ml。
值得一提的是有的封閉液中含有脫脂奶粉,不適合長期保存。

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