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MS培養(yǎng)基配制注意事項

時間:2013-7-2閱讀:828
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 MS培養(yǎng)基配制注意事項

配制培養(yǎng)液時應(yīng)注意:
1.在使用提前配制的母液時,應(yīng)在量取各種母液之前,輕輕搖動盛放母液的瓶子,如果發(fā)現(xiàn)瓶中有沉淀、懸浮物或被微生物污染,應(yīng)立即淘汰這種母液,重新進(jìn)行配制;為防止母液被微生物污染,有機(jī)母液放在冰箱里4℃保存;[1]
2.用量筒或移液管量取培養(yǎng)基母液之前,必須用所量取的母液將量筒或移液管潤洗2次;
3.量取母液時,將各種母液按將要量取的順序?qū)懺诩埳希咳?種,劃掉1種,以免出錯。溶化瓊脂 用粗天平分別稱取瓊脂9 g、蔗糖30 g,放入1 000 mL的搪瓷量杯中,再加入蒸餾水750 mL,用電爐加熱,邊加熱邊用玻璃棒攪拌,直到液體呈半透明狀。然后再將配好的混合培養(yǎng)液加入到煮沸的瓊脂中,zui后加蒸餾水定容至1 000 mL,攪拌均勻。

需要注意的是,在加熱瓊脂,制備培養(yǎng)基的過程中,操作者千萬不能離開,否則沸騰的瓊脂外溢,就需要重新稱量、制備。此外,如果沒有搪瓷量杯,可用大燒杯代替。但要注意大燒杯底的外表面不能沾水,否則加熱時燒杯容易炸裂,使溶液外溢,造成燙傷。調(diào)pH 用滴管吸取物質(zhì)的量濃度為1 mol/L的NaOH溶液,逐滴滴入溶化的培養(yǎng)基中,邊滴邊攪拌,并隨時用pH試紙測培養(yǎng)基的pH,一直調(diào)到培養(yǎng)基的pH為6(5.8~6.5)左右為止。培養(yǎng)基的分裝 溶化的培養(yǎng)基應(yīng)該趁熱分裝。分裝時,先將培養(yǎng)基倒入燒杯中,然后將燒杯中的培養(yǎng)基倒入錐形瓶(50 mL或100 mL)中。注意不要讓培養(yǎng)基沾到瓶口和瓶壁上。錐形瓶中培養(yǎng)基的量約為錐形瓶容量的1/5~1/4。每1 000 mL培養(yǎng)基,可分裝25~30瓶。培養(yǎng)基分裝完畢后,應(yīng)及時封蓋瓶口。用2塊硫酸紙(每塊大小約為9 cm×9 cm)中間夾1層薄牛皮紙封蓋瓶口,并用線繩捆扎。zui后在錐形瓶外壁貼上標(biāo)簽。

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