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南京森貝伽生物科技有限公司

解讀細(xì)胞培養(yǎng)常見問題

時(shí)間:2013-5-31閱讀:942
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1、PFHM-II  和HYBRIDOMA-SFM之間有什么差別?-細(xì)胞培養(yǎng)常見問題

PFHM-II  (Protein-free Hybridoma Medium)是不包含有蛋白質(zhì)的單克隆抗體生產(chǎn)培養(yǎng)基。如果作為雜交瘤生產(chǎn)培養(yǎng)基使用,PFHM-II 可能需 要補(bǔ)充低水平的血清。HYBRIDOMA-SFM 即是雜交瘤生產(chǎn)培養(yǎng)基,也是單克隆抗體生產(chǎn)培養(yǎng)基。它包含低水平的蛋白質(zhì)。

 

2、在High  Five無血清培養(yǎng)基中去污劑的濃度是多少?-細(xì)胞培養(yǎng)常見問題

High  Five 無血清培養(yǎng)基中去污劑的濃度:0.025 g/L  Tween-80,1.0 g/L  Pluronic  Poly-all。

 

3、High Five細(xì)胞用多大的密度凍存?-細(xì)胞培養(yǎng)常見問題

3.0x10E6 cells/ml

 

4、在我的果蠅培養(yǎng)基中發(fā)現(xiàn)形成白色沉淀,加熱后溶解。它是什么?對(duì)我的細(xì)胞有害嗎? -細(xì)胞培養(yǎng)常見問題

可能是*沉淀,但是更可能是 L-*沉淀。培養(yǎng)基中*的濃度比典型的 2mM 高 6 倍。*的濃度比在 RPMI 1640 中高 25 倍, 而且比*更加難以溶解。沉淀也可能是不止一種成分的復(fù)合物。它可能是由于貯存在局部溫度較低的地方引起。只要沉淀在培養(yǎng)條件下可以 溶解,對(duì)實(shí)驗(yàn)不會(huì)有不利的影響。

 

5、在Sf9,  Sf21,  和high  Five細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時(shí),肝素的使用量是多少?-細(xì)胞培養(yǎng)常見問題 

為了防止懸浮培養(yǎng)細(xì)胞聚集的形成,使用肝素濃度為 10 單位/毫升細(xì)胞懸液。

 

6、在重新凍存sf9 細(xì)胞前,它可以傳多少代?隨著傳代的次數(shù)的增加,它的感染能力會(huì)降低嗎? -細(xì)胞培養(yǎng)常見問題

通常情況當(dāng)細(xì)胞經(jīng)過 30 次傳代后,應(yīng)該返回凍存。無論什么時(shí)候記數(shù)時(shí),都應(yīng)該檢查細(xì)胞活力。如果超過 95%的細(xì)胞保持有活力和在大約 30小 時(shí)左右加倍,細(xì)胞仍然可以使用。如果活力和加倍時(shí)間下降,它們的感染力將不在是有效的。

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