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南京森貝伽生物科技有限公司

人乙型肝炎病毒 e 抗原(HBeAg)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)

時間:2012-12-7閱讀:914
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人乙肝炎病毒 e HBeAg聯(lián)免疫析(ELISA

 

 

試劑使用說明書

 

 

本試劑僅供研使       目的:本試劑用于檢測人血,血漿及相關 液體樣本中乙型肝炎病毒 e 抗原(HBeAg)水平。

實驗原理:

心酶聯(lián)ELISA 測定肝炎 e  HBeAg。被微,抗體,可與炎病 e 抗原HBeAg) 相結,經(jīng)合的 HRP ,形成-抗原

-酶標抗體,經(jīng)過徹底洗加底 TMB 。TMB HRP 轉化在酸作用轉化zui的黃。用標儀在 450nm  長下定吸度(OD  CUTOFF 值相比,從而判定 e HBeAg否。

 

試劑盒組成:

 

試劑組成

48 配置

96 配置

保存

說明書

1

1

 

封板膜

2 48

2 96

 

密封袋

1

1

 

酶標被板

1×48

1×96

2-8℃保存

陰性

0.5ml×1

0.5ml×1

2-8℃保存

陽性

0.5ml×1

0.5ml×1

2-8℃保存

酶標

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

樣品釋液

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

A

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

B

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

終止液

3ml×1

6ml×1

2-8℃保存

濃縮滌液

20ml×20 ×1

20ml×30 ×1

2-8℃保存

 

 

樣本處理及要求:

1.  然凝 10-20 , 20 鐘左2000-3000 /集上清,現(xiàn)淀,。

2.  漿據(jù)的要求選擇 EDTA 酸鈉作為,混合 10-20 分鐘

20 2000-3000 /。清,保存,應再次 離心。

3.  尿集,離心 20 右(2000-3000 /。上清,保過程 中如,離心。照實。

4.  養(yǎng)測分泌性份時,用菌管集。離 20 2000-3000 / 。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用 PBSPH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞 濃度 100 /ml 左右通過,使破壞內(nèi)。離心 20


鐘左2000-3000 /。仔程中,次離。

5.  標本,重量。 PBSPH7.4。氮迅速冷備 用。然保 2-8℃的溫。 PBSPH7.4或勻漿器將標漿。離心 20 分鐘2000-3000 /。。分裝后一待 檢測,

6. 采集后早進行提取,提取按相文獻進行,取后應盡進行實驗。不能上進行放于-20,凍融.

7.  測含 NaN3 , NaN3 氧化的(HRP。

 

操作步驟:

1.    孔按序編,性對 2 、對照 2 、空白 1

孔(及酶作相

2.    加樣:別在陰、陽性對照孔中入陰性對照、陽性50µl。然后在待測樣品先 加樣 40µl,再加 10µl。將樣,盡不 觸及,

3.    溫育板后 37 30 鐘。

4.    配液 3048T 20 )倍 600ml

5.    洗滌,棄去,滿洗靜置 30 去,此 重復 5 。

6.    加酶標試 50µl,。

7.    溫育 3

8.    洗滌 5。

9.    顯色顯色 A 50µl,顯色 B 5l,,37避光

15

10.  終止終止 50µl,終轉黃。

11.  測定調(diào)零,450nm 波長依OD 加終止液后 15 內(nèi)行。

 

結果判定:

孔平1.00;  對照平均值0.10

CUT OFF)計算:=+0.15

OD < CUT OFF)者為乙型 e 抗原HBeAg性 陽 OD CUT OFF)者為乙型 e 抗原HBeAg

注意事項

1書進行,不得用。

2環(huán)中取出應平衡 15-30 鐘后使,板開未 用完,中保。

3結晶析出加溫,結果。

4 封板使,以避。

5

6以酶標儀數(shù),使長檢, 630nm

7和各種廢理。 2M 硫酸,使須注意全。


保存條件及有效期

1保存;2-8℃。

26 個月

 

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