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南京森貝伽生物科技有限公司

牛病毒性腹瀉病毒抗體(BVDV Ab)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)

時間:2012-11-30閱讀:909
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牛病性腹瀉病毒抗體BVDV Ab酶聯(lián)疫分析(ELISA

 

 

試劑使用說明書

 

 

本試劑僅供研使       目的:本試劑用于檢測牛血,血漿中病毒 性腹瀉病毒抗體(BVDV Ab)水平。

實驗原理:

心酶聯(lián)ELISA定標(biāo)毒抗BVDV Ab。被微孔板,抗原,樣品BVDV Ab) 相結(jié),經(jīng)結(jié)合的 HRP 標(biāo)結(jié),形成-抗體

-酶標(biāo)抗原復(fù),經(jīng)過徹底洗加底 TMB TMB HRP 轉(zhuǎn)化, 在酸作用轉(zhuǎn)化zui的黃。用標(biāo)儀在 450nm  長下定吸度(OD  ,CUTOFF 值相比,從而判定標(biāo)病毒BVDV Ab存在否。

 

試劑盒組成:

 

試劑組成

192 配置

96 配置

保存

說明書

1

1

 

封板膜

4 96

2 96

 

密封袋

2

1

 

酶標(biāo)被板

2×96

1×96

2-8℃保存

陰性

1.0ml×1

0.5ml×1

2-8℃保存

陽性

1.0ml×1

0.5ml×1

2-8℃保存

酶標(biāo)

12ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

樣品釋液

12 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

A

12ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

B

12ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

終止液

12ml×1

6ml×1

2-8℃保存

濃縮滌液

20ml×100 ×1

20ml×30 ×1

2-8℃保存

 

 

樣本處理及要求:

1.  然凝 10-20 , 20 鐘左2000-3000 轉(zhuǎn)/。集上清,現(xiàn)淀,應(yīng)。

2.  漿應(yīng)據(jù)標(biāo)的要求選擇 EDTA 酸鈉作為,混合 10-20 分鐘,

20 2000-3000 轉(zhuǎn)/。清,保存,應(yīng)再次 離心。

3.  尿集,離心 20 右(2000-3000 轉(zhuǎn)/。上清,保過程 中如應(yīng)離心。、照實。

4.  養(yǎng)測分泌性份時,用菌管集。離 20 2000-3000 轉(zhuǎn)/ 。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用 PBSPH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞 濃度 100 /ml 左右。通過復(fù)使破壞內(nèi)。離心 20


鐘左2000-3000 轉(zhuǎn)/。仔。程中應(yīng)次離。

5.  標(biāo)本標(biāo),重量。 PBS,PH7.4氮迅速冷備 用。標(biāo)然保 2-8℃的溫 PBSPH7.4,或勻漿器將標(biāo)漿。離心 20 分鐘2000-3000 轉(zhuǎn)/。。分裝后一待 檢測,

6. 標(biāo)采集后早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,取后應(yīng)盡進行實驗。不能上進行,標(biāo)放于-20,應(yīng)復(fù)凍融.

7.  測含 NaN3 , NaN3 氧化的(HRP。

 

操作步驟:

1.    應(yīng)孔按序編應(yīng)設(shè)性對 2 、對照 2 空白 1

孔(及酶標(biāo),作相

2.    加樣:別在陰、陽性對照孔中入陰性對照、陽性50µl。然后在待測樣品先 加樣 40µl,再加 10µl將樣標(biāo),盡不 觸及,

3.    溫育板后 37 30 鐘。

4.    配液 30192T 100 倍)水至 600ml 后備用

5.    洗滌,棄去,滿洗靜置 30 去,此 重復(fù) 5 ,。

6.    加酶標(biāo)試 50µl,。

7.    溫育 3。

8.    洗滌 5。

9.    顯色顯色 A 50µl,顯色 B 5l,37避光

15

10.  終止終止 50µl,終應(yīng)轉(zhuǎn)黃

11.  測定調(diào)零450nm 波長依OD 。 應(yīng)加終止液后 15 內(nèi)行。

 

結(jié)果判定:

孔平1.00;  對照平均值0.10

CUT OFF)計算:=+0.15

OD < CUT OFF者為牛病BVDV Ab

陰性

樣品 OD CUT OFF者為牛病BVDV Ab) 陽性

注意事項

1書進行,不得用。

2環(huán)中取出應(yīng)平衡 15-30 鐘后使,標(biāo)板開未用完應(yīng)中保。

3結(jié)晶析出,加溫,結(jié)果。

4 封板使,以避。

5。

6結(jié)以酶標(biāo)儀數(shù)準(zhǔn)使長檢, 630nm

7,和各種廢應(yīng)理。 2M 硫酸,使


注意全。

 

 

保存條件及有效期

1保存;2-8℃。

26 個月

 

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