實時定量PCR*手冊

時間：2016-4-6閱讀：914

方法簡介
所謂的實時熒光定量 PCR 就是通過對 PCR 擴增反應中每一個循環(huán)產(chǎn)物熒光信號的實時檢測從而實現(xiàn)對起始模板定量及定性的分析。在實時熒光定量 PCR 反應中，引入了一種熒光化學物質(zhì)，隨著 PCR 反應的進行，PCR 反應產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線。

RT-QPCR是由三個步驟組成:
1.反轉(zhuǎn)錄:依賴反轉(zhuǎn)錄酶將RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNDA;
2.擴增:用PCR的方法擴增cDNA;
3.檢測:實時檢測和定量擴增的產(chǎn)物.

RT-qRCR影響分析可靠性關(guān)鍵點(Key porint):
1.分析結(jié)果依賴于模板的數(shù)量、質(zhì)量以及合理的檢測方法設計
2.反轉(zhuǎn)錄反應的非標準化影響試驗的穩(wěn)定性
3.數(shù)據(jù)分析應該高度客觀，如果不合理的分析，從分析結(jié)果中會得到混淆的錯誤結(jié)果，因此通過對RT-qPCR的每一組分進行質(zhì)量評價以達到zui小化變異性，zui大化可重復性，而且還需要沿用一個通用的數(shù)據(jù)分析的指南。對基因表達分析的標準化的需要是與人類臨床診斷分析相適應的。

實時定量PCR*手冊

亚洲精品中文视频,在线观看aaa,丁香五月欧美成人,亚洲成人高清,成人免费观看视频在线观看,在线日韩中文,成人av免费播放

實時定量PCR*手冊

會員登錄

收藏該商鋪

提示