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標(biāo)準(zhǔn)品
培養(yǎng)基
培養(yǎng)基原料 霍亂弧菌診斷血清 大腸艾希氏菌診斷血清 志賀氏菌屬診斷血清 沙門氏菌屬診斷血清 標(biāo)準(zhǔn)血清,診斷血清 抗生素藥敏紙片 微生物配套試劑 微生物生化管 管裝培養(yǎng)基 即用型液體培養(yǎng)基 一次性培養(yǎng)基平板 顯色培養(yǎng)基 臨床培養(yǎng)基 菌種保存培養(yǎng)基 四環(huán)素檢定、厭氧亞硫酸鹽還原桿菌檢測培養(yǎng)基 維生素檢測培養(yǎng)基 一次性衛(wèi)生用品衛(wèi)生檢測培養(yǎng)基 罐頭食品商業(yè)無菌檢測培養(yǎng)基 飲用水及水源檢測培養(yǎng)基 藥品、生物制品檢測培養(yǎng)基 化妝品檢測培養(yǎng)基 動物細(xì)胞培養(yǎng)基 啤酒檢驗(yàn)培養(yǎng)基 軍團(tuán)菌檢測培養(yǎng)基 支原體檢測培養(yǎng)基 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 彎曲桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、厭氧菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 阪崎腸桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 溶血性鏈球菌檢測培養(yǎng)基 李斯特氏菌檢測培養(yǎng)基 弧菌檢測培養(yǎng)基 乳酸菌、雙歧桿菌檢測培養(yǎng)基 酵母、霉菌檢測培養(yǎng)基 檢測培養(yǎng)基 沙門氏菌、志賀氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌及腸桿菌科檢測培養(yǎng)基 細(xì)菌總數(shù)檢測,增菌培養(yǎng)基
抗體
生物試劑
細(xì)胞
菌株
血清
細(xì)胞分離試劑
試劑盒

實(shí)時熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)體系的設(shè)計與優(yōu)化

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時熒光定量PCR以其、快速、方便,越來越多的應(yīng)用在科研、臨床及檢驗(yàn)檢疫的各個領(lǐng)域。但是定量PCR是對性要求很高的實(shí)驗(yàn),不僅要求在實(shí)驗(yàn)前有比較完整的實(shí)驗(yàn)設(shè)計方案,而且實(shí)驗(yàn)的條件對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響也非常大。這些都是很多老師與學(xué)生非常關(guān)心的問題,下面分別從這兩個方面來對定量PCR實(shí)驗(yàn)做一些闡述。 
定量pcr實(shí)驗(yàn)步驟(以mRNA為例): 
1.設(shè)計實(shí)驗(yàn)方案:例如對樣品、實(shí)驗(yàn)組和對照組的一個實(shí)驗(yàn)流程設(shè)計 
2.引物和探針的設(shè)計和合成 
3.抽提RNA,測定提取的RNA的濃度 
4.反轉(zhuǎn)錄PCR 
5.定量PCR 
6.數(shù)據(jù)分析 
在進(jìn)行定量PCR實(shí)驗(yàn)的過程中,PCR的擴(kuò)增效率是一個非常重要的影響因素,因?yàn)槎縋CR原理的理論方程是基于擴(kuò)增效率zui大值1,因此高的擴(kuò)增效率能保證定量PCR實(shí)驗(yàn)的性及重復(fù)性,影響PCR擴(kuò)增效率主要有以下幾個方面:1,擴(kuò)增子的長度;2,擴(kuò)增子的GC含量;3,擴(kuò)增子、引物和探針的二級結(jié)構(gòu);4,PCR反應(yīng)各組分的濃度;5,RNA或者cDNA的純度。 
進(jìn)行定量PCR實(shí)驗(yàn)時,必須設(shè)計好引物和探針,除了能獲得高的擴(kuò)增效率外,對PCR擴(kuò)增的特異性、消除基因組DNA的擴(kuò)增及提高擴(kuò)增的靈敏度都有很大的影響。下圖就是使用不同的引物和探針對18SRNA進(jìn)行定量PCR的熒光曲線圖(反應(yīng)條件和模板都相同)。

實(shí)時熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)體系的設(shè)計與優(yōu)化

探針設(shè)計的基本原則:
1. 保守:探針要的保守,有時分型就僅僅依靠探針來決定。理論上有一個堿基不配對,就可能檢測不出來。

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