高等生物是由多細(xì)胞構(gòu)成的整體,在整體條件下要研究單個細(xì)胞或某一群細(xì)胞在體內(nèi)(in vivo)的功能活動是十分困難的。但是如果把活細(xì)胞拿到體外(in vitro)培養(yǎng)進行觀察和研究,則要方便得多。活細(xì)胞離體后要在一定的生理條件下才能存活和進行生理活動,特別是高等動植物細(xì)胞要求的生存條件極其嚴(yán)格,稍有不適就要死亡。所以細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)(cell culture)就是選用*生存條件對活細(xì)胞進行培養(yǎng)和研究的技術(shù)。
動物細(xì)胞的生存環(huán)境與植物細(xì)胞差別很大,因而二者的培養(yǎng)方法很不相同。
(一)動物細(xì)胞培養(yǎng)
細(xì)胞培養(yǎng)方式大致可分為兩種(圖2-25):一種是群體培養(yǎng)(mass culture),將含有一定數(shù)量細(xì)胞的懸液置于培養(yǎng)瓶中,讓細(xì)胞貼壁生長,匯合(confluence)后形成均勻的單細(xì)胞層;另一種是克隆培養(yǎng)(clonal culture),將高度稀釋的游離細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,各個細(xì)胞貼壁后,彼此距離較遠(yuǎn),經(jīng)過生長增殖每一個細(xì)胞形成一個細(xì)胞集落,稱為克?。╟lone)。一個細(xì)胞克隆中的所有細(xì)胞均來源于同一個祖先細(xì)胞。此外,為了制取細(xì)胞產(chǎn)品而設(shè)計了轉(zhuǎn)鼓培養(yǎng)法,使用大容量的圓培養(yǎng)瓶,在培養(yǎng)過程中不斷地轉(zhuǎn)動,使培養(yǎng)的細(xì)胞始終處于懸浮狀態(tài)之中而不貼壁。
細(xì)胞培養(yǎng)[cell culture]
圖2-25 群體培養(yǎng)(左)和克隆培養(yǎng)(右)
表2-3 目前實驗室中常用的幾種細(xì)胞系
細(xì)胞系名稱
細(xì)胞類型
來源
3T3
成纖維細(xì)胞
小鼠
HeLa
宮頸癌上皮細(xì)胞
人
BHK21
成纖維細(xì)胞
敘利亞倉鼠
PtKl
上皮細(xì)胞
袋鼠
L6
成肌細(xì)胞
大鼠
PCI2
嗜鉻細(xì)胞
大鼠
SP2
漿細(xì)胞
小鼠
SP2/0
骨髓瘤漿細(xì)胞
小鼠
CHO
卵巢細(xì)胞
中國地鼠