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上海雅吉生物科技有限公司
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RCA滾環(huán)擴(kuò)增試劑盒說(shuō)明書(shū)
2020-12-24 閱讀(1720)
RCA滾環(huán)擴(kuò)增試劑盒說(shuō)明書(shū)
| 滾環(huán)擴(kuò)增（rolling circle amplification，RCA）是近幾年發(fā)展起來(lái)的種核酸恒溫?cái)U(kuò)增方法。以環(huán)狀DNA為模板，通過(guò)個(gè)短的DNA引物（與部分環(huán)狀模板互補(bǔ)），在phi29 DNA 聚合酶催化下將dNTPs轉(zhuǎn)變成單鏈DNA，此單鏈DNA包含成百上千個(gè)重復(fù)的模板互補(bǔ)片段。這種方法不僅可以直接擴(kuò)增DNA和RNA，還可以實(shí)現(xiàn)對(duì)靶核酸的信號(hào)放大，靈敏度達(dá)到個(gè)拷貝的核酸分子，因此在核酸檢測(cè)中具有很大的應(yīng)用價(jià)值和潛力。 因其高靈敏度、高特異性和可操作性，RCA技術(shù)在基礎(chǔ)研究、實(shí)際檢測(cè)、醫(yī)療診斷及納米材料等方面都有很好的應(yīng)用，結(jié)合細(xì)胞原位檢測(cè)、單核苷酸多態(tài)性SNPs，蛋白質(zhì)分析、免疫芯片和全基因組的擴(kuò)增等研究都能發(fā)揮其巨大的優(yōu)勢(shì)。 RCA滾環(huán)擴(kuò)增試劑盒說(shuō)明書(shū)本滾環(huán)擴(kuò)增試劑盒配備的phi29 DNA聚合酶具有鏈置換和連續(xù)合成特性，可連續(xù)合成長(zhǎng)達(dá)70kb的DNA。另外，該酶具有3’→5’外切酶校讀功能，合成的DNA保性高。試劑盒配備的Random Hexamers為6堿基隨機(jī)引物可對(duì)目標(biāo)分子進(jìn)行指數(shù)放大（通常放大10000倍）。 | ||||||||||||||
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主要特征 | ||||||||||||||
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RCA滾環(huán)擴(kuò)增試劑盒說(shuō)明書(shū)組分 | ||||||||||||||
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儲(chǔ)存 | ||||||||||||||
| -20℃可保存3年，避免反復(fù)凍融。 | ||||||||||||||
RCA滾環(huán)擴(kuò)增試劑盒說(shuō)明書(shū)實(shí)例 | ||||||||||||||
| 1. 應(yīng)用本試劑盒以pEasy質(zhì)粒為模板， 30℃作用5h。泳道1-5是模板濃度分別為0.0004，0.004， 0.04，0.4，1 ng/μl ，泳道6-10分別為泳道1-5相對(duì)應(yīng)的RCA產(chǎn)物用PstI酶切后的產(chǎn)物，M 為D10000 DNA Marker。
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| 2. 應(yīng)用本試劑盒以人基因組為模板， 30℃作用5h。泳道1-6是模板濃度分別為 0.0004，0.002，0.004，0.04，0.4，1 ng/μl ，M 為D10000 DNA Marker。
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