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上海邦景實業(yè)有限公司

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大鼠腎小球系膜細胞技術(shù)參數(shù)

2020-7-14  閱讀(382)

一、細胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片

二、使用方法

在技術(shù)部標準操作流程下,大鼠腎小球系膜細胞可傳3-5代;建議您收到細胞后盡快進行相關(guān)實驗。

客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3. 細胞傳代

1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;

2) 添加0.25%消化液1mL至培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml*培養(yǎng)基終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2-1:3適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);

4) 待細胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

三、注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過程中,消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通;由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們lian系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

5. 該細胞只可用于科研。

備注:由于實驗所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同,以上方法僅供各實驗室參考

 



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