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上海莼試生物技術(shù)有限公司

進(jìn)口檢測試劑盒熒光素酶檢測技術(shù)實(shí)驗(yàn)流程

時間:2017-5-25閱讀:396
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進(jìn)口檢測試劑盒為取得測定效果,在用單管的熒光測定儀測定時,樣品和測定試劑混合后到測定前的時間應(yīng)盡量控制在相同時間內(nèi),例如30秒內(nèi)。

由于溫度對酶反應(yīng)有影響,所以測定時樣品和試劑均需達(dá)到室溫后再進(jìn)行測定。

為保證熒光素酶檢測試劑的穩(wěn)定性,可以采取適當(dāng)分裝后避光保存的方法,以避免反復(fù)凍融和長時間暴露于室溫。一般來說,如果不分裝使用三次(期間凍融三次),對測定結(jié)果無明顯影響。

進(jìn)口檢測試劑盒樣品和測定試劑混合后,必須等待1-2秒,再進(jìn)行測定。測定時間通常為10秒,根據(jù)情況也可以測定更長或更短時間,但是同一批樣品使用相同的測定時間。

為避免由于質(zhì)粒轉(zhuǎn)細(xì)胞時效率的差異而帶來的誤差,可以同時轉(zhuǎn)入Renilla熒光素酶的報(bào)告基因質(zhì)粒作為內(nèi)參,采用雙熒光素酶報(bào)告基因檢測試劑盒進(jìn)行檢測;也可以同時轉(zhuǎn)入β-半乳糖甘酶報(bào)告基因質(zhì)粒作為內(nèi)參,然后采用β-半乳糖苷酶報(bào)告基因檢測試劑盒進(jìn)行檢測。進(jìn)口檢測試劑盒采用熒光素酶報(bào)告基因檢測試劑盒中的報(bào)告基因細(xì)胞裂解液裂解獲得的樣品,可以直接用于β-半乳糖苷酶報(bào)告基因檢測試劑盒中的測定。

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