蠟樣芽孢桿菌 CMCC(B)63301
深圳子科生物提供的凍干菌種大部分是由國(guó)內(nèi)外菌種保藏中心（ATCC，CMCC，CICC，NCTC等）提供的凍干菌種（0代）復(fù)蘇活化后傳代培養(yǎng)，所生產(chǎn)的菌株大部分為前3代工作菌種，質(zhì)量保證，售后齊全！
蠟樣芽孢桿菌 CMCC(B)63301使用說(shuō)明書(shū)：
1、 復(fù)蘇菌種前應(yīng)準(zhǔn)備適于該菌種生長(zhǎng)的固體、液體培養(yǎng)基和培養(yǎng)設(shè)備，所有操作均應(yīng)在符合生物安全保護(hù)及無(wú)菌條件下進(jìn)行。
2 、啟開(kāi)菌種前，用75%酒精棉消毒西林瓶表面。在無(wú)菌條件下，按鋁蓋上的箭頭方向打開(kāi)塑蓋，撕開(kāi)鋁蓋，打開(kāi)西林瓶膠塞，加入0.3mL左右的配套液體培養(yǎng)基，用無(wú)菌滴管反復(fù)吹吸，將凍干菌種溶解成為懸液，然后用無(wú)菌滴管或接種環(huán)移至斜面、平板或液體培養(yǎng)基，并連同剩余菌懸液的西林瓶一起放置于36℃培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。(菌種與培養(yǎng)和保存方法對(duì)應(yīng)表見(jiàn)附表1，培養(yǎng)基、培養(yǎng)方法和傳代保存方法見(jiàn)附表2)。
3、次日觀察菌種的生長(zhǎng)情況，如未生長(zhǎng)，應(yīng)繼續(xù)培養(yǎng)24h，或吸取培養(yǎng)之后的菌懸液中再次接種培養(yǎng)基，培養(yǎng)24h觀察。
4 、菌株為一次性使用品，開(kāi)啟之后不能反復(fù)使用或保存，暫不開(kāi)啟的菌種應(yīng)在4℃保藏。
5 、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用，建議菌種使用5代后棄用。
注)：購(gòu)買(mǎi)后請(qǐng)盡量及時(shí)使用凍干菌種，如發(fā)現(xiàn)菌種不活或污染等情況，請(qǐng)?jiān)谫?gòu)買(mǎi)之日起1個(gè)月內(nèi)與我們。
凍干菌種復(fù)蘇示意圖：
附表1 菌種與培養(yǎng)和保存方法對(duì)應(yīng)表
附表2 培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件和保存方法
方法1：
無(wú)菌條件下，用無(wú)菌吸管往西林瓶?jī)龈删壑屑尤肽X心浸液培養(yǎng)基，充分懸浮后取適量的菌懸液于營(yíng)養(yǎng)瓊脂(022020)斜面上35-37℃劃線培養(yǎng)24-48h。斜面(*代)放于4℃冰箱保存，每個(gè)月轉(zhuǎn)接一次，代數(shù)以此類(lèi)推，建議使用菌種代數(shù)不超過(guò)5代，5代后菌種應(yīng)銷(xiāo)毀。
方法2：
無(wú)菌條件下，用無(wú)菌吸管往西林瓶?jī)龈删壑屑尤肽X心浸液培養(yǎng)基，充分懸浮后取適量的菌懸液于營(yíng)養(yǎng)瓊脂(022020)斜面上劃線35-37℃培養(yǎng)24-48h。斜面(*代)放于25℃下保存，每個(gè)月轉(zhuǎn)接一次，代數(shù)以此類(lèi)推，建議使用菌種代數(shù)不超過(guò)5代，5代后菌種應(yīng)銷(xiāo)毀。
方法3：
無(wú)菌條件下，用無(wú)菌吸管往西林瓶?jī)龈删壑屑尤肽X心浸液培養(yǎng)基，充分懸浮后取適量的菌懸液于血平板(024070)后涂布，35-37℃培養(yǎng)24-48h。平板(*代)放于4℃冰箱保存，并用封口膜或其它封條密封平板，每半個(gè)月轉(zhuǎn)接一次，代數(shù)以此類(lèi)推，建議使用菌種代數(shù)不超過(guò)5代，5代后菌種應(yīng)銷(xiāo)毀。
方法4：
無(wú)菌條件下，用無(wú)菌吸管往西林瓶?jī)龈删壑屑尤肽X心浸液培養(yǎng)基，充分懸浮后取適量的菌懸液于胰蛋白胨大豆酵母浸膏瓊脂(TSA-YE)(026020)斜面上 35-37℃培養(yǎng)24-48h。斜面(*代)放于4℃冰箱保存，每個(gè)月轉(zhuǎn)接一次，代數(shù)以此類(lèi)推，建議使用菌種代數(shù)不超過(guò)5代，5代后菌種應(yīng)銷(xiāo)毀。
方法5：
無(wú)菌條件下，用無(wú)菌吸管往西林瓶?jī)龈删壑屑尤肽X心浸液培養(yǎng)基，充分懸浮后取適量的菌懸液于皰肉牛肉粒肉湯(027140)加液體石蠟1cm,35-37℃培養(yǎng)48-72h。肉湯(*代)放于4℃冰箱環(huán)境下保存，每半個(gè)月轉(zhuǎn)接一次，代數(shù)以此類(lèi)推，建議使用菌種代數(shù)不超過(guò)5代，5代后菌種應(yīng)銷(xiāo)毀。
方法6：
無(wú)菌條件下，用無(wú)菌吸管往西林瓶?jī)龈删壑屑尤雺A性蛋白胨水，充分懸浮后取適量的菌懸液于堿性瓊脂(025040)斜面上35-37℃培養(yǎng)24-48h。斜面(*代)放于25℃下保存，每個(gè)月轉(zhuǎn)接一次，代數(shù)以此類(lèi)推，建議使用菌種代數(shù)不超過(guò)5代，5代后菌種應(yīng)銷(xiāo)毀。
方法7：
無(wú)菌條件下，用無(wú)菌吸管往西林瓶?jī)龈删壑屑尤?%NaCl堿性蛋白胨水，充分懸浮后放置于36℃下復(fù)蘇8-12小時(shí)。取適量的菌懸液于3%NaCl營(yíng)養(yǎng)瓊脂(營(yíng)養(yǎng)瓊脂(022020)加入2.5gNaCl/100mL)斜面上35-37℃培養(yǎng)24-48h。斜面(*代)放于25℃下保存，每個(gè)月轉(zhuǎn)接一次，代數(shù)以此類(lèi)推，建議使用菌種代數(shù)不超過(guò)5代，5代后菌種應(yīng)銷(xiāo)毀。
方法8：
無(wú)菌條件下，用無(wú)菌吸管往西林瓶?jī)龈删壑屑尤肷呈弦后w培養(yǎng)基，充分懸浮后取適量的菌懸液于馬鈴薯葡萄糖瓊脂 (PDA)(021050)斜面25-28℃培養(yǎng)2-5天。斜面(*代)放于4℃冰箱保存，每?jī)蓚€(gè)月轉(zhuǎn)接一次，代數(shù)以此類(lèi)推，建議使用菌種代數(shù)不超過(guò)5代，5代后菌種應(yīng)銷(xiāo)毀。
方法9：
無(wú)菌條件下，用無(wú)菌吸管往西林瓶?jī)龈删壑屑尤氩际先鉁?，充分懸浮后取適量的菌懸液于血平板(024070)42±1℃微需氧條件下培養(yǎng)48-72h。平板(*代)放于4℃冰箱微需氧環(huán)境下保存，并用封口膜或其它封條密封平板，每個(gè)星期轉(zhuǎn)接一次，代數(shù)以此類(lèi)推，建議使用菌種代數(shù)不超過(guò)5代，5代后菌種應(yīng)銷(xiāo)毀。
方法10：
無(wú)菌條件下，用無(wú)菌吸管往西林瓶?jī)龈删壑屑尤隩PY肉湯，充分懸浮后取適量的菌懸液于BBL瓊脂(027330)斜面厭氧環(huán)境下35-37℃培養(yǎng)48h-72h。斜面(*代)放于4℃冰箱厭氧環(huán)境下保存，每個(gè)星期轉(zhuǎn)接一次，代數(shù)以此類(lèi)推，建議使用菌種代數(shù)不超過(guò)5代，5代后菌種應(yīng)銷(xiāo)毀。
方法11：
無(wú)菌條件下，用無(wú)菌吸管往西林瓶?jī)龈煞壑屑尤朊撝谭廴芤海浞謶腋『笕∵m量的菌懸液于脫脂奶粉溶液(10%)35-37℃培養(yǎng)48h-72h。 菌種(*代)放于4℃冰箱保存，每?jī)蓚€(gè)星期轉(zhuǎn)接一次，代數(shù)以此類(lèi)推，建議使用菌種代數(shù)不超過(guò)5代，5代后菌種應(yīng)消毀；
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