鴨免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒子科生物現(xiàn)貨供應(yīng),子科生物進(jìn)口elisa試劑盒,國(guó)產(chǎn)elisa試劑盒,elisa試劑盒說(shuō)明書(shū),elisa試劑盒免費(fèi)代測(cè),ELISA試劑盒技術(shù)服務(wù),如需Elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)及報(bào)價(jià),可我司。
標(biāo)本類型:
ELISA 常見(jiàn)的標(biāo)本一般包括:
● 液體類標(biāo)本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
● 培養(yǎng)細(xì)胞
● 組織標(biāo)本
這些標(biāo)本收集的時(shí)間、方法和保存都有一定的要求。
可用作 ELISA 測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液)、 細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞、組織等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定,有些 則需經(jīng)預(yù)處理。
鴨免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒● 血清:
室溫血液自然凝固 10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。收集上清。如 有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
● 血漿:
應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇 EDTA 、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,加入 10 %( v/v )抗凝劑 ( 0.1M 檸檬酸鈉或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合 10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右 ( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形 成,應(yīng)再次離心。
●尿液、胸腹水、腦脊液:
用無(wú)菌管收集。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成, 應(yīng)再次離心。
●細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集 上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的 成份時(shí),用 PBS ( PH7.2-7.4 )稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到 100 萬(wàn) /ml 左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
●細(xì)胞:
檢測(cè)細(xì)胞的成份時(shí),對(duì)于貼壁細(xì)胞,去除培養(yǎng)液,用PBS、理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍。加 入適量裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞10 秒后,細(xì)胞 就會(huì)被裂解。對(duì)于懸浮細(xì)胞,離心收集細(xì)胞,用PBS、理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍.加入適 量裂解液, 用槍吹打把細(xì)胞吹散。用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉 淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝然后再裂解。充分裂解后,10000-14000g離心3-5 分鐘,取上 清,即可進(jìn)行后續(xù)操作。
●組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的 PBS 或組織蛋白萃取試劑,緩沖液中可加入蛋白酶抑制 劑。用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集 上清置于 -20 度或 - 70 度保存,如有必要,可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
鴨免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)測(cè)定具體步驟:
1.確定本次檢測(cè)所需的已包被抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目,并增加 1 孔作為 TMB 空白顯色孔。 總數(shù)=樣品數(shù)+9;做雙份檢測(cè)時(shí)×2。其余重包裝好放如冰箱中。
2.將標(biāo)準(zhǔn)品各 0.1ml 依次加入一排 7 孔中,1 孔只加樣品稀釋液的作為零孔。對(duì)于血清、體液、 組織勻漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清,直接加已用樣品稀釋液稀釋的樣品 100μ ι 。
3.酶標(biāo)板加上蓋,37℃反應(yīng) 90 分鐘。
4.反應(yīng)后用自動(dòng)洗板機(jī)吸去酶標(biāo)板內(nèi)的液體;或甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體,再對(duì)著吸水紙拍幾下。 不洗。
5.將準(zhǔn)備好的生物素抗體工作液按每孔 0.1ml 依次加入。(TMB 空白顯色孔除 外)。37℃反應(yīng) 60 分鐘。
6. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 3 次,每次浸泡 1 分鐘左右。
7.將準(zhǔn)備好的 ABC 工作液按每孔 0.1ml 依次加入(TMB 空白顯色孔除外)。37℃反應(yīng) 30 分鐘。
8. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 5 次,每次浸泡 1-2 分鐘左右。
9.按每孔 90μ ι 依次加入已在 37℃平衡 30 分鐘的 TMB 顯色液,37℃避光反應(yīng) 20-25 分鐘 (注意:顯色時(shí)間供參考,因用戶實(shí)驗(yàn)室條件差異,顯色時(shí)間會(huì)有所不同。此時(shí)肉眼可 見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前 3-4 孔有明顯的梯度藍(lán)色,后 3-4 孔差別不明顯)。
10.按每孔 0.1ml 依次加入 TMB 終止液,此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。
11.用酶標(biāo)儀在 450nm 測(cè)定 OD值。
ZK-B7128 牛S100鈣結(jié)合蛋白(S100) ELISA Kit Bovine S100 Calcium Binding Protein (S100) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-B7129 牛粘蛋白1(MUC1) ELISA Kit Bovine Mucin 1 (MUC1) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-B7130 牛上皮性鈣黏附蛋白(CDHE) ELISA Kit Bovine Cadherin, Epithelial (CDHE) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-B7131 牛嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF) ELISA Kit Bovine Eosinophil Chemotactic Factor (ECF) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-B7132 牛內(nèi)分泌腺來(lái)源血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF) ELISA Kit Bovine Endocrine Gland Derived Vascular Endothelial Growth Factor (EG-VEGF) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-B7133 牛E選擇素(SELE) ELISA Kit Bovine Selectin, Endothelium (SELE) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-B7134 牛血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(PROCR) ELISA Kit Bovine Protein C Receptor, Endothelial (PROCR) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-B7135 牛凋亡相關(guān)因子(FAS) ELISA Kit Bovine Factor Related Apoptosis (FAS) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-B7136 牛酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF1) ELISA Kit Bovine Fibroblast Growth Factor 1, Acidic (FGF1) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-B7137 牛促生長(zhǎng)激素釋放激素(GHRH) ELISA Kit Bovine Growth Hormone Releasing Hormone (GHRH) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-B7138 牛甲狀旁腺激素(PTH) ELISA Kit Bovine Parathyroid Hormone (PTH) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-B7139 牛成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子4(FGF4) ELISA Kit Bovine Fibroblast Growth Factor 4 (FGF4) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-B7140 牛胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白5(IGFBP5) ELISA Kit Bovine Insulin Like Growth Factor Binding Protein 5 (IGFBP5) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
ZK-B7141 牛轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(TTR) ELISA Kit Bovine Transthyretin (TTR) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物