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人白細(xì)胞共同抗原(LCA/CD45)ELISA試劑盒

時(shí)間:2017-2-16閱讀:224
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人白細(xì)胞共同抗原(LCA/CD45)ELISA試劑盒深圳子科生物ZIKER品牌ELISA試劑盒免費(fèi)代測,2017年開年*中!進(jìn)行詢價(jià),全場可以享受7折優(yōu)惠!并可享受滿減活動(dòng),滿10000減1000,滿5000減200元,滿1000元減50元,期待與您的合作!

人白細(xì)胞共同抗原(LCA/CD45)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理:
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗該指標(biāo)抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。

ELISA中有三個(gè)必要的試劑:免疫吸附劑、結(jié)合物和酶的底物等。
完整的ELISA試劑盒包含以下各組分:
1、已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);
2、酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);
3、酶的底物;
4、陰性對(duì)照品和陽性對(duì)照品(定性測定中),參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測定中);
5、結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;
6、洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;
酶反應(yīng)終止液,常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸,其濃度按加量及比色液的zui終體積而異,在板式ELISA中一般采用2mol/L。

人白細(xì)胞共同抗原(LCA/CD45)ELISA試劑盒標(biāo)本的保存:在5天內(nèi)測定的標(biāo)本可放置于4℃,超過一周測定的需低溫凍存。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測的標(biāo)本,儲(chǔ)存在4 ℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集?biāo)本,將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20 ℃或 -70 ℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本2 -8 ℃ 可保存48小時(shí),-20 ℃可保存1個(gè)月。-70度可保存6個(gè)月。部分標(biāo)本也可加入適當(dāng)防腐劑,激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。 

實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng)
1.試劑準(zhǔn)備:所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫,使用后請(qǐng)立即按照說明書要求保存。實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2.加樣:加樣時(shí),要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔之見的時(shí)間間隔過大,否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,從而影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性;一般加樣時(shí)間控制在10分鐘內(nèi),如果樣本數(shù)量過多,可使用多道移液器。
3.孵育:樣品要在密閉的容器內(nèi)進(jìn)行孵育,嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4.洗滌:洗滌過程中反應(yīng)孔中的殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指痕跡,避免影響zui后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5.反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,10分鐘左右),如果顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
6.建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高,應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
7.建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個(gè)標(biāo)本),如果對(duì)本試劑盒有任何疑問,可和所購經(jīng)銷商,如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。

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