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小鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA檢測(cè)試劑盒

時(shí)間:2016-10-24閱讀:264
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小鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA檢測(cè)試劑盒

1. 血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)了夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3.細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注:標(biāo)本溶血會(huì)影響zui后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。

小鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA檢測(cè)試劑盒標(biāo)本的稀釋原則:
首先通過(guò)文獻(xiàn)檢索的方式了解待測(cè)樣本的大致含量,確定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi),檢測(cè)的結(jié)果才是準(zhǔn)確的。稀釋的過(guò)程中,應(yīng)做好詳細(xì)的記錄。zui后計(jì)算濃度時(shí),稀釋了“N”倍,標(biāo)本的濃度應(yīng)再乘以“N”。


操作步驟
實(shí)驗(yàn)開始前,請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過(guò)高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4.每孔加辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。

小鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA檢測(cè)試劑盒相關(guān)產(chǎn)品如下:

脂肪酸代謝系列                
ZIKER165    游離脂肪酸含量測(cè)試盒    可見分光光度法     50管/48樣    ZIKER子科
ZIKER166    脂肪酸合成酶(FAS)測(cè)試盒    紫外分光光度法    10管/9樣    ZIKER子科
ZIKER167    脂肪酸合成酶(FAS)測(cè)試盒    紫外分光光度法    25管/24樣    ZIKER子科
ZIKER168    脂肪酸合成酶(FAS)測(cè)試盒    紫外分光光度法    50管/48樣    ZIKER子科
ZIKER169    脂肪酶(LPS)測(cè)試盒    可見分光光度法    50管/48樣    ZIKER子科
ZIKER171    脂氧合酶(LOX)測(cè)試盒    紫外分光光度法     50管/48樣    ZIKER子科
ZIKER172    ?;D(zhuǎn)移酶(AAT)測(cè)試盒    可見分光光度法    10管/9樣    ZIKER子科
ZIKER173    ?;D(zhuǎn)移酶(AAT)測(cè)試盒    可見分光光度法    25管/24樣    ZIKER子科
ZIKER174    ?;D(zhuǎn)移酶(AAT)測(cè)試盒    可見分光光度法    50管/48樣    ZIKER子科
ZIKER176    脂蛋白酯酶(LPL)&肝脂酶(HL)測(cè)試盒    可見分光光度法     50管/24樣    ZIKER子科
ZIKER177    甘油三酯(TG)含量測(cè)試盒    可見分光光度法     50管/48樣    ZIKER子科
ZIKER178    血清總膽固醇(TC)含量測(cè)試盒    可見分光光度法    50管/48樣    ZIKER子科
ZIKER179    血清游離膽固醇(FC)含量測(cè)試盒    可見分光光度法    50管/48樣    ZIKER子科
淀粉系列                
ZIKER180     淀粉含量測(cè)試盒    可見分光光度法    50管/48樣    ZIKER子科
ZIKER181     淀粉含量測(cè)試盒    酶標(biāo)法    100管/96樣    ZIKER子科
ZIKER182    α-淀粉酶測(cè)試盒    可見分光光度法    50管/24樣    ZIKER子科
ZIKER183    α-淀粉酶測(cè)試盒    酶標(biāo)法    100管/48樣    ZIKER子科
ZIKER184    β-淀粉酶測(cè)試盒    可見分光光度法    50管/24樣    ZIKER子科
ZIKER185    β-淀粉酶測(cè)試盒    酶標(biāo)法    100管/48樣    ZIKER子科
ZIKER186    ADPG焦磷酸化酶(AGP)測(cè)試盒    紫外分光光度法    50管/48樣    ZIKER子科
ZIKER187    ADPG焦磷酸化酶(AGP)測(cè)試盒    紫外分光光度法    25管/24樣    ZIKER子科
ZIKER188    可溶性淀粉合成酶(SSS)測(cè)試盒    紫外分光光度法    50管/48樣    ZIKER子科
ZIKER189    可溶性淀粉合成酶(SSS)測(cè)試盒    紫外分光光度法    25管/24樣    ZIKER子科
ZIKER190    結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)測(cè)試盒    紫外分光光度法    50管/48樣    ZIKER子科
ZIKER191    結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)測(cè)試盒    紫外分光光度法    25管/24樣    ZIKER子科
ZIKER192    淀粉分支酶(SBE)測(cè)試盒    可見分光光度法    50管/24樣    ZIKER子科

 

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