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大鼠干擾素α13(IFNα13)ELISA試劑盒

時(shí)間:2017/6/19閱讀:215
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大鼠干擾素α13(IFNα13)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理:
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗該指標(biāo)抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。

大鼠干擾素α13(IFNα13)ELISA試劑盒Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配;
2、檢測前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上;
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸;
4、待檢樣品要澄清,否則會影響結(jié)果;
5、溫浴時(shí)間應(yīng)遵守試劑盒規(guī)定;
6、應(yīng)盡量做雙孔實(shí)驗(yàn),這樣才能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性;
7、對結(jié)果有疑問的樣品要用其它方法進(jìn)行確證 。

操作步驟:
1、 取出試劑盒,于室溫(20-25℃)放置15-30分鐘。實(shí)驗(yàn)過程應(yīng)在室溫(20-25℃)內(nèi)進(jìn)行。
2、 取出酶標(biāo)板,按照標(biāo)準(zhǔn)品的次序分別加入50μl的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中。
3、空白微孔中加入50μl的樣品,空白對照加入50μl的蒸餾水;
4、 在樣品孔中加入10μl的生物素;(不含空白對照孔,切忌:生物素只加樣品孔!)
5、在各孔中加入100μl的酶標(biāo)記溶液;(不含空白對照孔)
6、將酶標(biāo)板用封口膠密封后,37℃孵育反應(yīng) 1小時(shí);(在孵育箱中保持穩(wěn)定的溫度與濕度)
7、 充分清洗酶標(biāo)板3-5次,保持各孔有充足的水壓;(濃縮洗滌液以1:100的比例與蒸餾水稀釋)
8、酶標(biāo)板洗滌后用吸水紙*拍干;
9、各孔加入顯色劑A、B液各50μl;(不含空白對照孔)
10、各孔加入50μl終止液,終止反應(yīng);10、20-25℃下避光反應(yīng)15分鐘;

結(jié)果判斷:
1、30分鐘內(nèi)在波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值;
2、以O(shè)D值為縱坐標(biāo),以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo),繪制曲線圖;
3、根據(jù)樣品的OD值查找對應(yīng)的濃度范圍;

大鼠干擾素α13(IFNα13)ELISA試劑盒Wako     032-21541    2-Cl-C.OXT-A    for Cellbiology    1mg    -
        新型核酸衍生體2-Cl-C.OXT-A            
Wako     031-22731    Cordycepin    for Genetic Research    25mg    73-03-0
        脫氧腺苷            
                    
Wako     019-23293    Albumin, from Bovine Serum (BSA), Cohn Fraction V, pH7.0    for Biochemistry    50g    9048-46-8
        牛血清蛋白, pH7.0            
Wako     019-21272    Albumin, from Bovine Serum (BSA), pH5.2(Fraction V)    Wako 1st Grade    25g    9048-46-8
        牛血清白蛋白,pH5.2            
Wako     015-23295    Albumin, from Bovine Serum (BSA), Cohn Fraction V, pH7.0    for Biochemistry    500g    9048-46-8
        牛血清蛋白, pH7.0            
Wako     015-21274    Albumin, from Bovine Serum (BSA), pH5.2(Fraction V)    Wako 1st Grade    100g    9048-46-8
        牛血清白蛋白,pH5.2            
Wako     013-23291    Albumin, from Bovine Serum (BSA), Cohn Fraction V, pH7.0    for Biochemistry    10g    9048-46-8
        牛血清蛋白, pH7.0            
Wako     013-21275    Albumin, from Bovine Serum (BSA), pH5.2(Fraction V)    Wako 1st Grade    500g    9048-46-8
        牛血清白蛋白,pH5.2            
Wako     012-23381    Albumin, from Bovine Serum (BSA), pH7.0, New Zealand Origin    for Cell Culture    5G    9048-46-8
        牛血清蛋白, pH7.0, 來源于新西蘭            
Wako     011-21276    Albumin, from Bovine Serum (BSA), pH5.2(Fraction V)    Wako 1st Grade    1kg    9048-46-8
        牛血清白蛋白            
Wako     011-21271    Albumin, from Bovine Serum (BSA), pH5.2(Fraction V)    Wako 1st Grade    1g    9048-46-8
        牛血清白蛋白,pH5.2            
Wako     010-23382    Albumin, from Bovine Serum (BSA), pH7.0, New Zealand Origin    for Cell Culture    25G    9048-46-8
        牛血清蛋白, pH7.0, 來源于新西蘭            
Wako     296-60501    DNA Extractor SP kit    for Genetic Research    50Tests    -
        血清血漿中DNA抽提試劑盒            

 

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