牛27kDa熱休克蛋白(HSPB1) ELISA試劑盒樣本收集使用注意事項(xiàng)： 

●每個標(biāo)本量收集體積＝ 100ul × 檢測種類，如要做復(fù)孔，標(biāo)本量收集體積＝ 100ul × 檢測 種類×2 。 
● 對于作某一個具體指標(biāo)來說，先用一系列稀釋度作一批標(biāo)本測定，得出對實(shí)驗(yàn)有意義 的一個稀釋度（即測定劑量反應(yīng)曲線），然后用一個zui適稀釋度測定即可。 
● 收集標(biāo)本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測的標(biāo)本，儲存在 4 ℃ 備用，如有特殊原因需要周期收集標(biāo)本，將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在 -20 ℃ 或 -70 ℃ 條 件下保存。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本 2 -8 ℃ 可保存 48 小時(shí)， -20 ℃ 可保存 1 個月。 -70 度 可保存 6 個月。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。 
● 血清標(biāo)本采集時(shí)，應(yīng)注意避免溶血，紅細(xì)胞溶解時(shí)會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)， 以 HRP 為標(biāo)記的 ELISA 測定中，溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色。 
●為了保證尿液檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，必須正確收集尿液標(biāo)本和保存。盛尿容器要清潔干燥。 使用一次性的容器（如塑料尿杯），避免因用藥并清洗不干凈而造成的污染，影響檢 測結(jié)果。尿液標(biāo)本必須新鮮，留取后，應(yīng)及時(shí)檢測或保存，以免細(xì)菌繁殖。因在室溫中久 置后（尤其是夏季）尿中磷酸鹽等可析出結(jié)晶而干擾檢測。 
● 標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測。如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性 HRP，也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。 保存過久可發(fā)生聚合在 ELISA 中可使本底加深。 
● 凍結(jié)標(biāo)本融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛 倒混和，不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩。 
● 混濁或有沉淀的標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾，澄清后再檢測。 
● 反復(fù)凍融會使蛋白效價(jià)降低，所以待測標(biāo)本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。也可 加入適當(dāng)防腐劑。 
● 如果您在實(shí)驗(yàn)中遇到任何特殊問題，敬請咨詢我公司深圳子科生物技術(shù)部。

牛27kDa熱休克蛋白(HSPB1) ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng)
1.試劑準(zhǔn)備：所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存。實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
2．加樣：加樣時(shí)，要控制加樣速度，避免*孔與zui后一孔之見的時(shí)間間隔過大，否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間，從而影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性；一般加樣時(shí)間控制在10分鐘內(nèi)，如果樣本數(shù)量過多，可使用多道移液器。
3.孵育：樣品要在密閉的容器內(nèi)進(jìn)行孵育，嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4.洗滌：洗滌過程中反應(yīng)孔中的殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干，同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指痕跡，避免影響zui后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5.反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如，10分鐘左右)，如果顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
6.建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
7.建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線，試用幾個標(biāo)本)，如果對本試劑盒有任何疑問，可和所購經(jīng)銷商，如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效，可要求調(diào)換，但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。

牛27kDa熱休克蛋白(HSPB1) ELISA試劑盒操作步驟
1. 取出試劑盒，于室溫(20-25℃)放置15-30分鐘。實(shí)驗(yàn)過程應(yīng)在室溫(20-25℃)內(nèi)進(jìn)行。
2. 取出酶標(biāo)板，按照標(biāo)準(zhǔn)品的次序分別加入50μl的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中。
3. 空白微孔中加入50μl的樣品，空白對照加入50μl的蒸餾水；
4. 在樣品孔中加入10μl的生物素；(不含空白對照孔,切忌：生物素只加樣品孔！)
5. 在各孔中加入100μl的酶標(biāo)記溶液；(不含空白對照孔)
6. 將酶標(biāo)板用封口膠密封后，37℃孵育反應(yīng) 1小時(shí)；(在孵育箱中保持穩(wěn)定的溫度與濕度)
7. 充分清洗酶標(biāo)板3-5次，保持各孔有充足的水壓；(濃縮洗滌液以1：100的比例與蒸餾水稀釋)
8. 酶標(biāo)板洗滌后用吸水紙*拍干；
9. 各孔加入顯色劑A、B液各50μl；(不含空白對照孔)
10. 20-25℃下避光反應(yīng)15分鐘；
11.各孔加入50μl終止液，終止反應(yīng)；

牛27kDa熱休克蛋白(HSPB1) ELISA試劑盒耐酸性染色液     10ml X 3瓶    盒
硝酸鹽還原試劑(甲)、(乙)     10ml*2    盒
MUG     0.2g    盒
甘油     1g×10支    盒
甘油(綠膿菌素測定用培養(yǎng)基配套試劑)     1g×10支    盒
40%無菌尿素溶液     2ml*10支    盒
無菌液體石蠟     10ml    盒
Lugol氏碘液     10ml    盒
班氏試劑(葡萄糖酸鹽試劑)     10ml    盒
10% FeCl3試劑(苯丙氨酸試劑)     10ml    盒
過氧化氫酶試劑     10支    盒
氧化酶試紙     10片/盒    盒
凍干血漿     0.5ML×10支    盒
亞碲酸鹽卵黃增菌劑     2.5ml×10瓶    盒
0.5%無菌TTC溶液     2ml/支×10    盒
鈉氏試劑     10ml    盒
茚三酮試劑(馬尿酸鹽試劑)     10m    盒
3.4% FeCl3試劑(TDA配套試劑)     10ml    盒