牛腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)說(shuō)明:
1.試劑盒保存:-20℃(較長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí));2-8℃(頻繁使用時(shí))。
2.濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
3.中、英文說(shuō)明書可能會(huì)有不一致之處,請(qǐng)以英文說(shuō)明書為準(zhǔn)。
4.剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水樣物質(zhì),此為正常現(xiàn)象,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。
牛腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒操作步驟
各試劑在使用前平衡至室溫。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。除空白孔外,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)溶液或待測(cè)樣品100ul,注意不要有氣泡,輕輕混勻,酶標(biāo)板加上蓋,37℃反應(yīng)120分鐘。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。
3. 每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100ul,37℃,60分鐘。洗板3次,350ul/每孔,甩干。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液 100ul,37℃,60分鐘,洗板5次,甩干。
5. 依序每孔加底物溶液90ul,37℃避光顯色30分鐘(此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯)。
6. 依序每孔加終止溶液50ul,終止反應(yīng)(此時(shí)蘭色立轉(zhuǎn)黃色)。用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。
●注意:1.每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2NH2SO4。測(cè)量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零。
2.為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)。
●洗板方法:
手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。
自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。
牛腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒786-R49 AP labeled rabbit α-human IgG (0.6mg/ml) 1ml
786-WBP Western Blot Pack 1 kit
A025-A Agarose Electrophoresis System with Power Supply (Input 110V) 1
A025-B Agarose Electrophoresis System with Power Supply (Input 100-230V) 1
A043 Ammonium Acetate 100g
A051-B Ampicillin 5g
A101-B Antibody: BE Antibody 4 (HRP Secondary) 10U
A121-B Assay Strips (8 wells/strip) 12
A131 Assay Strip Holder 1
API-01 Actinomycin D [10mM] 50µl
API-02 Camptothecin [2mM] 1ml
API-03 Cycloheximide [100mM] 1ml
API-04 Dexamethasone [10mM] 1ml
API-05 Doxorubicin [2mM] 50µl
API-06 Etoposide [100mM] 50µl
API-16S Apoptotic Inducer Set Set of 6
BB01 Botanical Garden Blot (Green Algae, Yeast, Barley, Sweet Corn, Rye Grass, Oat, Wheat, Soy, Mung, Sunflower, Cotton, Beet, Tomato, Spinach) 1 Blot
BC01 BSOCOES (Bis [2-(Succinimidooxycarbonyloxy)ethyl] Sulfone) 100mg
BC03 DPDPB (1,4-Di [3’-(2’-pyridyldithio)propionamido] Butane) 100mg
BC04 DSS (Disuccinimidyl Suberate) 1g
BC04-Q OneQuant DSS (Disuccinimidyl Suberate) 8 x 2mg
BC05 DST (Disuccinimidyl Tartrate) 1g
BC06 Sulfo DST (Sulfo Disulfosuccinimidyl Tartrate) 100mg
BC07 DSP (Dithiobis(succinimidyl Propionate)) 1g
BC08 DTSSP (3,3’-Dithiobis(sulfosuccinimidyl Propionate)) 100mg
BC09 EGS (Ethylene Glycol bis(succinimidyl succinate)) 1g
BC11 MBS (m-Maleimidobenzoyl-N-hydroxysuccinimide Ester) 100mg
BC12 Sulfo MBS (m-Maleimidobenzoyl-N-hydroxysulfosuccinimide Ester ) 100mg
BC13 GMBS (N-Maleimidobutyryloxysuccinimide ester) 100mg
BC14 Sulfo GMBS (N-Maleimidobutyryloxysulfosuccinimide ester) 100mg