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犬簇集蛋白(CLU) ELISA試劑盒

時(shí)間:2017/4/18閱讀:333
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犬簇集蛋白(CLU) ELISA試劑盒深圳子科生物技術(shù)原理
   (1)抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。
   (2)結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。
   (3)酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。
   (4)受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。
   (5)此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。
   (6)加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。測(cè)定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復(fù)性好。以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù);

犬簇集蛋白(CLU) ELISA試劑盒ELISA中有三個(gè)必要的試劑:免疫吸附劑、結(jié)合物和酶的底物等。完整的ELISA試劑盒包含以下各組分:
    (1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);
    (2)酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);
    (3)酶的底物;
    (4)陰性對(duì)照品和陽(yáng)性對(duì)照品(定性測(cè)定中),參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測(cè)定中);
    (5)結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;
    (6)洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;
    (7)酶反應(yīng)終止液,常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸,其濃度按加量及比色液的zui終體積而異,在板式ELISA中一般采用2mol/L。

操作步驟
1. 取出試劑盒,于室溫(20-25℃)放置15-30分鐘。實(shí)驗(yàn)過(guò)程應(yīng)在室溫(20-25℃)內(nèi)進(jìn)行。
2. 取出酶標(biāo)板,按照標(biāo)準(zhǔn)品的次序分別加入50μl的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中。
3. 空白微孔中加入50μl的樣品,空白對(duì)照加入50μl的蒸餾水;
4. 在樣品孔中加入10μl的生物素;(不含空白對(duì)照孔,切忌:生物素只加樣品孔!)
5. 在各孔中加入100μl的酶標(biāo)記溶液;(不含空白對(duì)照孔)
6. 將酶標(biāo)板用封口膠密封后,37℃孵育反應(yīng) 1小時(shí);(在孵育箱中保持穩(wěn)定的溫度與濕度)
7. 充分清洗酶標(biāo)板3-5次,保持各孔有充足的水壓;(濃縮洗滌液以1:100的比例與蒸餾水稀釋)
8. 酶標(biāo)板洗滌后用吸水紙*拍干;
9. 各孔加入顯色劑A、B液各50μl;(不含空白對(duì)照孔)
10. 20-25℃下避光反應(yīng)15分鐘;
11. 各孔加入50μl終止液,終止反應(yīng);

犬簇集蛋白(CLU) ELISA試劑盒察氏瓊脂    250g
Czapek Dox Agar    
高鹽察氏瓊脂    250g
Salt Czapek Dox Agar    
馬鈴薯葡萄糖瓊脂    250g
 Potato Dextrose Agar(PDA)    
沙保羅瓊脂培養(yǎng)基    250g
Sabourauds Agar    
沙保羅液體培養(yǎng)基    250g
Liquid Sabouraud Medium    
產(chǎn)毒培養(yǎng)基    250g
Toxin-Producing Medium    
玉米粉瓊脂    250g
Corn Meat Medium    
虎紅瓊脂培養(yǎng)基(孟加拉紅)    250g
Rose Bengal Medium    
麥芽浸粉瓊脂(MEA)    250g
Malt Extract Agar    
麥芽浸粉肉湯(MEB)    250g
Malt Extract Broth    
沙氏BHI瓊脂    250g
Sabouraud BHI Agar    
曲霉菌瓊脂基礎(chǔ)    250g
Aspergillus Agar ZIKERse    
酵母膏、麥芽膏瓊脂    250g
Yeast Extract-Medium Extract Agar     
馬鈴薯葡萄糖肉湯    250g
 Potato Dextrose (PDA)    

 

 

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