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大鼠利鈉肽受體1(NPR1)ELISA試劑盒

時(shí)間:2017/4/7閱讀:390
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大鼠利鈉肽受體1(NPR1)ELISA試劑盒用于標(biāo)記ELISA試劑盒里抗體或抗抗體的酶須具有下列特性:
1、有高度的活性和敏感性;
2、在室溫下穩(wěn)定;
3、反應(yīng)產(chǎn)物易于顯現(xiàn);
4、能商品化生產(chǎn)。
當(dāng)前應(yīng)用較多的有辣根過氧化物酶(HRP)、堿性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等,其中以HRP應(yīng)用zui廣。

標(biāo)本的采集及保存:
1.血清:標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8℃1000 x g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

大鼠利鈉肽受體1(NPR1)ELISA試劑盒操作步驟
各試劑在使用前平衡至室溫。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。除空白孔外,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)溶液或待測(cè)樣品100ul,注意不要有氣泡,輕輕混勻,酶標(biāo)板加上蓋,37℃反應(yīng)120分鐘。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。
3. 每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100ul,37℃,60分鐘。洗板3次,350ul/每孔,甩干。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液 100ul,37℃,60分鐘,洗板5次,甩干。
5. 依序每孔加底物溶液90ul,37℃避光顯色30分鐘(此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯)。
6. 依序每孔加終止溶液50ul,終止反應(yīng)(此時(shí)蘭色立轉(zhuǎn)黃色)。用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。

注意:

1.每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2NH2SO4。測(cè)量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零。
      2.為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)。

結(jié)果判斷與分析:
1、 儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2、 以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的LTB4標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的LTB4含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度,再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。

大鼠利鈉肽受體1(NPR1)ELISA試劑盒葡萄糖肉浸液肉湯    250g        用于溶血性鏈球菌的增菌培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
Dextrose Meat Infusion Broth            
匹克氏肉湯基礎(chǔ) A    100g        用于溶血性鏈球菌的增菌培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
Pick's Broth ZIKERse A            
肉浸液肉湯培養(yǎng)基    250g        用于溶血性鏈球菌和蠟樣芽孢桿菌的培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
Meat Infusion Broth            
疊氮鈉葡萄糖肉湯    250g        用于鏈球菌的增菌培養(yǎng)
Aziode Dextrose Broth            
乙基紫疊氮鈉肉湯    250g        用于鏈球菌的增菌培養(yǎng)
Ethyl Violet Aziode Broth            
KF鏈球菌瓊脂    100g        用于鏈球菌的選擇性分離及計(jì)數(shù)(SN標(biāo)準(zhǔn))
KF Streptococcus Agar            

 

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