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BSA的配制方法(子科生物)

時(shí)間:2016/8/16閱讀:18628
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1.BSA封閉液的配制

石蠟切片做免疫熒光的時(shí)候用4%BSA in PBS +0.05% Tween 20

細(xì)胞免疫熒光的時(shí)候用 1%BSA in PBS + 0.05% Tween 20

2.0.1%BSA怎么配

直接用水配就行了!按體積比就行!看你干什么用!要是用來PCR可以用dd水配制!

3.20%BSA應(yīng)該怎么配置

這是w/v濃度。20%BSA的配制方法:在無菌條件下,稱取20.00克牛血清白蛋白(BSA),用dmem培養(yǎng)基[DMEM(高糖)購自Gibco BRL公司]溶液溶解后定容到100毫升,調(diào)pH值至7.4后用0.45 um濾膜過濾除菌(較難過濾),zui后放入4℃冰箱保存。

4.體積分?jǐn)?shù)為0.5%的牛血清白蛋白(BSA)如何配制?用水配還是用別的溶劑呢?

如果是做ELISA之類免疫學(xué)實(shí)驗(yàn),用PBS就可以了,0。5%就是稱0。5克BSA然后溶在100mlPBS里面。

5.BSA溶液的配置方法?

牛血清白蛋白就是我們常說的BSA.

牛血清白蛋白的相對(duì)分子質(zhì)量為10的4次方這個(gè)級(jí)別,它不是一定的,是多聚物,有的地方測(cè)的70 000,這就是一個(gè)數(shù)據(jù)了。在做PCR的時(shí)候會(huì)用到它。

是血液的主要成分(38g/100ml),分子量68kD。等電點(diǎn)4.8。含氮量16%,含糖量0.08%。僅含已糖和已糖胺,含脂量只有0.2%。白蛋白由581個(gè)氨基酸殘基組成,其中35個(gè)半胱氨酸組成17個(gè)二硫鍵,在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽離子、陰離子和其他小分子物質(zhì)結(jié)合。血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營養(yǎng)作用。在動(dòng)物細(xì)胞無血清培養(yǎng)中,添加白蛋白可起到生理和機(jī)械保護(hù)作用和載體作用。

牛血清蛋白溶液可以作為測(cè)量蛋白質(zhì)含量的標(biāo)準(zhǔn)曲線用。

6.請(qǐng)問BSA溶液怎樣滅菌,用過濾膜應(yīng)該買哪種孔徑,什么型號(hào)的過濾膜?

用0。22UM的。。PVDF材質(zhì)的濾膜應(yīng)該好點(diǎn)。這種膜對(duì)蛋白的吸附小點(diǎn)

一般買回來的牛血清蛋白是細(xì)小片狀的乳白色粉末。

我現(xiàn)在想做細(xì)菌的分泌蛋白。但培養(yǎng)基里有10mg/ml的BSA。收集培養(yǎng)上清后,我嘗試過用10%TCA沉淀后用丙酮或者乙醇潤洗去除BSA的方法,但都表示很理想。我想請(qǐng)問各位,不知道誰有好的方法可以去除BSA。謝謝。

直接過柱子,吸附的是BSA,別的穿透,但是樣品需要沒鹽或者鹽濃度不能太高,降低ph到4-5可以提率.

7.聽說免疫組化時(shí),可以用1%BSA-PBS來稀釋一抗,不知該怎樣配制,誰試過,是否可降低背景染色?

就是用PBS液來稀釋BSA, 100mlPBS中加1gBSA. 一般情況下,可以提高適當(dāng)BSA的濃度,這樣的確可以減少非特異性吸附,從而降低背景染色. 也可以在稀釋液中加入其他的惰性蛋白,關(guān)鍵是要調(diào)節(jié)好一抗的濃度。

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