非特異性染色的原因

時間：2015/8/12閱讀：241

一、非特異性染色的識別

常出現(xiàn)在組織邊緣、膠原纖維及血漿滲出處，壞死組織及固定不良的組織中心處。表現(xiàn)為彌漫性，均勻性的背景染色。也可以是隨機(jī)分布的陽性反應(yīng)產(chǎn)物點、團(tuán)或塊狀。抗體

二、非特異性染色的原因

1. Ig與Fc受體結(jié)合

多見于冰凍切片（特別是淋巴造血組織，淋巴細(xì)胞，單核細(xì)胞，組織細(xì)胞表面多），主要是和二抗反應(yīng)，因為一抗一般稀釋度均較大，因此Fc受體的干擾基本不存在。由于福爾馬林固定破壞了大部分的Fc受體，所以石蠟切片不多見。

避免方法：

（1）用以二抗相同種族的正常血清封閉切片；

（2）用不含F(xiàn)c段的抗體，但價格貴。（V區(qū)，C1區(qū)不含F(xiàn)c段，用Pepsin消化）

2. 靜電吸附

抗體是一種帶負(fù)電荷的球蛋白，容易和帶正電荷的組織相結(jié)合，如膠原纖維。

避免方法：

（1）盡量稀釋一抗；

（2）降低抗體的電荷，如用2.5%NaCl，0.05mTBS代替PBS；

（3）用去垢劑如triton-100，Tween-20等處理切片。

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