親和組織化學(xué)法

時間：2015/7/15閱讀：352

親和組織化學(xué)法
? 是以一種物質(zhì)對某種組織成分具有高度親合力為基礎(chǔ)。
? 這種方法敏感性更高，有利于微量抗原(抗體)在細胞或亞細胞水平的定位。
*—抗*染色法

【原理】
?  *(biotin)又稱維生素H，是一種小分子維生素，分子量為244，是轉(zhuǎn)氨甲酰基化過程中的輔酶。
?  抗*(avidin)，又稱卵白素或親和素，是一種分子量為67000的堿性蛋白，對*具有很強的親和力，比抗原抗體間的親和力要高出100萬倍。它由4個亞基組成，每個亞基都有*的結(jié)合位點。

?  兩者均可與抗體等大分子生物活性物質(zhì)相偶聯(lián)，又可被酶類等多種示蹤物所標(biāo)記，形成*-抗*系統(tǒng)。
–  該系統(tǒng)一端偶聯(lián)大分子生物反應(yīng)體系，另一端連結(jié)標(biāo)記物，后者加入酶的底物，產(chǎn)生顏色反應(yīng)。

(1)標(biāo)記抗*—*法(labelled avidin-biotin method, LAB)：分為直接法和間接法。

? 直接法

用*標(biāo)記*抗體，與抗原結(jié)合；酶標(biāo)記抗*，與*結(jié)合，然后進行酶呈色反應(yīng)。
? 間接法

用*標(biāo)記二抗，酶標(biāo)記抗*，先用*抗體與組織抗原結(jié)合，再將第二抗體與*抗體相連結(jié)，zui后進行呈色反應(yīng)。

(2)橋抗*一*法(bridge avidin-biotin method，BRAB)
– 此法是用*分別標(biāo)記抗體和酶，以抗*為橋，把二者連接起來，進行呈色反應(yīng)。

(3) 抗*-*-過氧化物酶法

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親和組織化學(xué)法

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