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上海莼試生物技術(shù)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第2年

13585831301

ELISA試劑盒
ATCC細(xì)胞
細(xì)胞
蛋白
生化試劑
標(biāo)準(zhǔn)品
擔(dān)體
中國(guó)藥典標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)
IBL試劑盒
*原時(shí)間試劑
血清
肉類及相關(guān)產(chǎn)品 實(shí)驗(yàn)室耗材系列 細(xì)胞系列 抗體純化試劑 單抗、多抗研制用材料 細(xì)胞培養(yǎng)用材料和試劑 免疫分析相關(guān)試劑 免疫分析科研試劑盒 抗體純化試劑盒 抗血清系列 動(dòng)物血漿系列 熱滅活血清系列 碳吸附過(guò)濾血清系列 培養(yǎng)細(xì)菌專用血清系列 動(dòng)物血清系列(pet瓶) HRP標(biāo)記抗原 天然純化抗原 動(dòng)物Ig類抗原 基因重組抗原 膠體金標(biāo)記一抗(多抗為抗原親和純化,單抗為G或A蛋白親和純化 ) HRP標(biāo)記二抗(抗原親和純化) HRP標(biāo)記一抗(多抗為抗原親和純化,單抗為G或A蛋白親和純化) 多克隆抗體二抗/PcAb(未標(biāo)注的為G或A蛋白親和純化) 多克隆抗體一抗/PcAb(未標(biāo)注的為G或A蛋白親和純化) 單克隆抗體二抗/McAb(G或A蛋白親和純化) 單克隆抗體一抗/McAb(G或A蛋白親和純化) 裂解血 抗凝動(dòng)物血系列 脫纖維動(dòng)物血系列 無(wú)菌過(guò)濾動(dòng)物血清系列 輻照滅菌動(dòng)物血清系列 無(wú)菌采制動(dòng)物血清系列
科研抗體
PCR試劑盒
科研細(xì)胞
細(xì)胞生物學(xué)試劑

ELISA檢測(cè)試劑盒的新判分結(jié)果

時(shí)間:2015/4/23閱讀:302
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ELISA檢測(cè)試劑盒的判分結(jié)果

ELISA檢測(cè)試劑盒的結(jié)果判定分為定性和定量?jī)煞N:

兩類結(jié)果的判斷方法:

(1)間接法和夾心法

這類反應(yīng)的定性結(jié)果可以用肉眼判斷。目視標(biāo)本也無(wú)色或近于無(wú)色者判為陰性,顯色清晰者為陽(yáng)性。但在ELSIA中,正常人血清反應(yīng)后??沙霈F(xiàn)呈色的本底,此本底的深淺因試劑的組成和實(shí)驗(yàn)的條件不同而異,因此實(shí)驗(yàn)中必須加測(cè)陰性對(duì)照。陰性對(duì)照的組成應(yīng)為不含受檢物的正常血清或類似物。在用肉眼判斷結(jié)果時(shí),更宜用顯色深于陰性對(duì)照作為標(biāo)本陽(yáng)性的指標(biāo)。
目視法簡(jiǎn)捷明了,但頗具主觀性。在條件許可下,應(yīng)該用比色計(jì)測(cè)定吸光值,這樣可以得到客觀的數(shù)據(jù)。先讀出標(biāo)本(sample,S)、陽(yáng)性對(duì)照(P)、和陰性對(duì)照(N)的吸光值,然后進(jìn)行計(jì)算。計(jì)算方法有多種,大致可分為陽(yáng)性判定值法和標(biāo)本與陰性對(duì)照比值法兩類。

(2)競(jìng)爭(zhēng)法

在競(jìng)爭(zhēng)法ELISA中,陰性孔呈色深于陽(yáng)性孔。陰性呈色的強(qiáng)度取決于反應(yīng)中酶結(jié)合物的濃度和加入競(jìng)爭(zhēng)抑制物的量,一般調(diào)節(jié)陰性對(duì)照的吸光度在1.0-1.5之間,此時(shí)反應(yīng)zui為敏感。
競(jìng)爭(zhēng)法ELISA檢測(cè)試劑盒不易用自視判斷結(jié)果,因肉眼很難辨別弱陽(yáng)性反應(yīng)與陰性對(duì)照的顯色差異,一般均用比色計(jì)測(cè)定,讀出S、P和N的吸光值。計(jì)算方法主要也有兩種,即陽(yáng)性判定值法和抑制率法。
a. 陽(yáng)性判定值法
與間接法和夾心法中的陽(yáng)性判定值法基本相同,ELISA檢測(cè)試劑盒但在計(jì)算公式中引入陽(yáng)性對(duì)照A值,現(xiàn)舉某種檢測(cè)抗HBc的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對(duì)照為不含抗HBc的復(fù)鈣人血漿,陽(yáng)性對(duì)照中抗HBc含量為125±100u/ml。每次試驗(yàn)設(shè)2個(gè)陽(yáng)性對(duì)照和3個(gè)陰性對(duì)照。測(cè)得A值后,先計(jì)算陰性對(duì)照A值的平均值(NCX)和陽(yáng)性對(duì)照A值的平均數(shù)(PCX),兩個(gè)平均數(shù)的差(N-P)必須大于一個(gè)特定的數(shù)值(例如0.300),試驗(yàn)才有效。3個(gè)陰性對(duì)照A值均應(yīng)小于2.000,而且應(yīng)≥0.5×NCX并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范圍,則棄去,而以另2個(gè)陰性對(duì)照重新計(jì)算×NCX;如有2個(gè)陰性對(duì)照A超出以上范圍,則該次實(shí)驗(yàn)無(wú)效。陽(yáng)性判定值按下式計(jì)算:陰性判定值=0.4×NCX+0.6×PCX,標(biāo)本A值≤陽(yáng)性判定值的反應(yīng)為陽(yáng)性,A>陽(yáng)性判定值的反應(yīng)為陰性。

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