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新型雙色的光激活熒光蛋白

閱讀:270發(fā)布時間:2010-10-18

本公司專業(yè)供應(yīng)Elisa試劑盒,*,*,可免費提供代測服務(wù),咨詢:,
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目前的光激活熒光蛋白有PAGFP、光激活的mRFP1、KFP1Dronpa等,但其中一些蛋白光轉(zhuǎn)換效率不高,亮度較低,會迅速淬滅,或者需要多聚化。此外,光轉(zhuǎn)換通常伴隨著*種顏色的喪失,這樣不得不借助計算機方法來查看整個群體。

基于這些原因,來自英國愛丁堡大學(xué)愛丁堡癌癥研究中心的Arkadiusz Welman及其同事發(fā)明了一種新工具——光激活的綠櫻桃(photoactivatable Green Cherry,GPAC)。這是一個融合蛋白,它融合了紅色熒光蛋白(RFP)單體CherryGFP的光激活變異體。這種融合蛋白能夠在表達(dá)標(biāo)志物的細(xì)胞中持續(xù)發(fā)出紅色熒光,而綠色熒光只有在405-nm光激發(fā)下才會發(fā)出。文章發(fā)表在《生物化學(xué)雜志》(JBC)上。

表達(dá)GPAC的細(xì)胞在光激活前后都表現(xiàn)出強的紅色信號,而綠色熒光只持續(xù)數(shù)小時。研究人員還進(jìn)行了一些標(biāo)簽蛋白的測試。他們將融合蛋白放置在GPACN端或C端,發(fā)現(xiàn)均不影響其活性,也不會顯著影響胞內(nèi)蛋白的定位或功能。即便融合伴侶需要大量的翻譯后加工和修飾,GPAC仍可容忍。

作者認(rèn)為,GPAC能夠應(yīng)用在培養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞骨架動力學(xué)研究,以及果蠅的免疫細(xì)胞活體遷移研究。GPAC對于活體研究來說特別有優(yōu)勢,它既不依賴青色熒光,也不依靠熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET),這兩者于有限的組織。

然而,GPAC也并非。它的美中不足之處在于熒光標(biāo)簽相對較大,超過了50 kDa,這樣,與GPAC融合的蛋白在用于功能研究前就必須進(jìn)行仔細(xì)的驗證。盡管如此,GPAC提供了一種便利的方法來追蹤細(xì)胞或細(xì)胞器(通過紅色熒光),同時在時空動力學(xué)監(jiān)測中突出了光轉(zhuǎn)換的部分(綠色熒光)。

上海江萊生物科技有限公司專業(yè)經(jīng)銷眾多生命科學(xué)領(lǐng)域的ELISA試劑盒,物試劑抗體,培養(yǎng)基,血清為中國科研試劑供應(yīng)商之一,質(zhì)量被全國各大院??蒲袡C構(gòu)認(rèn)可,并為Elisa試劑盒長期供應(yīng)商,作為戰(zhàn)略合作伙伴。

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