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細胞培養(yǎng)添加物是優(yōu)化細胞生長環(huán)境的關(guān)鍵組分，其作用涵蓋營養(yǎng)供給、pH 穩(wěn)定及代謝調(diào)控等。以下是主要添加物的分類說明：
一、基礎(chǔ)營養(yǎng)添加物
?L-谷氨-酰胺?
?作用?：核心能量來源，參與蛋白質(zhì)合成和核酸代謝36。
?缺陷?：水溶液中自發(fā)降解（4℃存放1周降解50%），產(chǎn)生有毒氨類物質(zhì)36。
?替代方案?：
?GlutaMAX-I?（L-丙氨酰-L-谷氨-酰胺）：通過肽酶緩慢釋放谷氨-酰胺，穩(wěn)定性高，避免氨毒性。
?D-葡萄糖?
?作用?：主要碳源，支持能量代謝。
?類型差異?：
低糖型（1 g/L）：適合貼壁細胞（如成纖維細胞）。
高糖型（4.5 g/L）：適用于快速增殖細胞（如CHO細胞、雜交瘤細胞）。
?丙酮酸鈉?
?作用?：替代碳源，在葡萄糖不足時維持能量供應。
二、緩沖系統(tǒng)與pH穩(wěn)定劑
?碳酸-氫鈉?
?作用?：與CO?形成緩沖對，維持pH 7.2–7.4。
?使用條件?：
高濃度（1.5–3.7 g/L）：需5–10% CO?環(huán)境。
低濃度（0.35 g/L）：無需CO?培養(yǎng)箱。
?HEPES緩沖劑?
?作用?：非CO?依賴型緩沖劑，防止pH波動（尤其適用于克隆化培養(yǎng)）。
?優(yōu)勢?：無細胞毒性，長期維持pH穩(wěn)定。
?酚紅指示劑?
?作用?：pH可視化指示（紅：中性；黃：酸性；紫：堿性）。
?局限性?：干擾流式細胞檢測；模擬雌激素活性，影響激素敏感細胞（建議無血清培養(yǎng)時去除）。
三、血清及替代成分
?胎牛血清（FBS）?
?作用?：提供生長因子、激素及黏附蛋白，促進細胞增殖。
?添加比例?：常規(guī)培養(yǎng)需10%濃度。
?無血清替代添加劑?
?成分?：特定生長因子（如EGF、胰島素）、載體蛋白（如轉(zhuǎn)鐵蛋白）及微量元素。
?優(yōu)勢?：成分明確，減少批次差異，避免病毒污染風險。
四、其他功能添加物
?維生素與微量元素?
?B族維生素?：輔酶因子，支持代謝（如B?參與糖代謝脫羧）。
?微量元素?（鐵、鋅等）：
鐵：氧運輸與呼吸鏈關(guān)鍵組分；
鋅：調(diào)節(jié)酶活性及細胞增殖。
?抗生素?
?常用組合?：青-霉素-鏈-霉素（雙抗），預防細菌污染。
?注意?：長期使用可能掩蓋低水平污染，干擾實驗結(jié)果。
五、應用選擇建議
注：實際應用中需根據(jù)細胞特性（如代謝需求、激素敏感性）及實驗目的（如生產(chǎn)vs.研究）優(yōu)化添加物組合。
