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豚鼠前列腺素D2（PGD2） ELISA試劑盒技術(shù)原理

時(shí)間：2020/9/10閱讀：786

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白-4（MCP-4）水平。用純化的豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白-4（MCP-4）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入單核細(xì)胞趨化蛋白-4（MCP-4），再與HRP標(biāo)記的單核細(xì)胞趨化蛋白-4（MCP-4）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的單核細(xì)胞趨化蛋白-4（MCP-4）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白-4（MCP-4）濃度。

計(jì)算：

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，

在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD

值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋

倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)

準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值

代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋

倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。

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