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雞附紅細胞體探針法熒光定量PCR試劑盒標準曲線

時間:2020/4/14閱讀:961
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雞附紅細胞體(雞嗜血支原體)探針法熒光定量PCR試劑盒稀釋標準曲線樣品(以 0E2-0E7 拷貝/μL 這 6 個 0 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的 DNA 片段作為陽性對照。

. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。

2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。

3. 在 7 號管中加入 5 μL ×0E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩分鐘,得 ×0E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。

4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL ×0E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 分鐘,得 ×0E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。

5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL ×0E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩分鐘,得 ×0E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。

6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。

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