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Elisa試劑盒
細(xì)胞系
生化試劑
進(jìn)口PCR試劑盒
ELISA檢測試劑盒
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熒光定量PCR試劑盒
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人N末端B型利鈉肽原(NT-proBNP)試劑盒說明書

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人N末端B型利鈉肽原(NT-proBNP)試劑盒使用目的:
本試劑盒用于測定人血漿樣本中N末端B型利鈉肽原(NT-proBNP)含量。
實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人N末端B型利鈉肽原(NT-proBNP)水平。用純化的人N末端B型利鈉肽原(NT-proBNP)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入N末端B型利鈉肽原(NT-proBNP),再與HRP標(biāo)記的N末端B型利鈉肽原(NT-proBNP)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的N末端B型利鈉肽原(NT-proBNP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人N末端B型利鈉肽原(NT-proBNP)濃度。
相關(guān)產(chǎn)品:
五內(nèi)脂            含量:    ≥98%            Schisanlactone E    *
西貝堿    含量:    ≥98%    sipeimine    進(jìn)口,*
西紅花苷Ⅱ    含量:    ≥95%            Crocin II    進(jìn)口/國產(chǎn)
西            含量:    ≥98%            Dephnoretin    現(xiàn)貨供應(yīng)
    含量:    ≥98%    Asarone    *
細(xì)辛醛    含量:    ≥98%            Asarylaldehyde    進(jìn)口,*
仙茅苷            含量:    ≥98%            Curculigoside    進(jìn)口/國產(chǎn)
相思豆堿            含量:    ≥98%            Abrine    現(xiàn)貨供應(yīng)
香草酸            含量:    ≥98%            Vanillic acid    *
香蘭素            含量:    ≥98%            Vanillin    進(jìn)口,*

標(biāo)本要求 
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
人N末端B型利鈉肽原(NT-proBNP)試劑盒操作步驟
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
8000 pg/ml
5號標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
4000 pg/ml
4號標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2000 pg/ml
3號標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1000 pg/ml
2號標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
500 pg/ml
1號標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘。
10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.人N末端B型利鈉肽原(NT-proBNP)試劑盒測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

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